《免疫学》第6章 免疫沉淀试验-教学课件（非AI生成）.ppt

************************1.纯化抗原和抗体成分的分析2.正常及异常免疫球蛋白的识别与鉴定应用免疫电泳*-+（三）免疫电泳示意图**技术评价：1.分辨率较高2.仅定性3.扩散时间长，影响因素多，结果较难分析4.目前大量应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常体液蛋白的识别与鉴定。*抗原抗体在凝胶中直接发生沉淀反应，在适当位置形成抗原抗体复合物，经染色后，可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型原理区带电泳＋沉淀反应（四）免疫固定电泳*左图为IgGκ型,中图为IgGλ型，右为正常SPGAMκλSPGAMκλSPGAMκλ（四）免疫固定电泳示意图*原理：待检蛋白电泳固定剂及各类抗血清加于凝胶表面的泳道抗原与对应抗体反应沉淀漂洗染色某一抗原的存在?*分辨率强，敏感度高，操作周期短，仅需数小时，结果易于分析。应用最常用于M蛋白的鉴定与分型，也用于尿中本周氏蛋白质的检测与κ、λ分型，脑脊液中寡克隆蛋白的检测与分型。优点（四）免疫固定电泳*应用:M蛋白的鉴定和分型*（五）交叉免疫电泳（六）自动化免疫电泳*第四节免疫沉淀试验的临床应用

免疫浊度法：蛋白质的检测

如免疫球蛋白、补体、类风湿因子、C反应蛋白等

*第五节临床常用免疫沉淀试验试剂方法特点一、胶乳增强的透射免疫比浊试验在全自动生化分析仪中的应用二、胶乳增强的透射免疫比浊试验在血凝固分析仪中的应用三、免疫固定电泳在半自动电泳仪中的应用四、散射免疫比浊试验在特种蛋白免疫分析仪中的应用*第六节影响免疫沉淀试验的主要因素如温度、电解质、酸碱度等*名词:沉淀反应简答:1.双向免疫扩散试验的应用2.免疫电泳技术的类型思考题*1.根据海德堡曲线理论，下列说法不正确的是A抗原过量是产生钩状效应，沉淀物少B抗体过量时，沉淀物也少C抗原抗体比例适当时产生沉淀量最多D抗原过量导致测定失败E抗体过量导致测定失败*2.双向扩散试验中沉淀环弯向抗原一方是A抗原分子量大B抗体分子量大C抗原抗体分子大致相等D抗原扩散快E抗体扩散快3.单向扩散实验中小分子抗原和较短时间扩散（24h）的结果处理宜用AMancini曲线BFahey曲线C海德堡曲线D直线E抛物线*本章概要****************待检蛋白质抗原须具备的条件仅针对某待测抗原的单价特异性抗血清已知含量的标准品待测品含量在1.25?g/ml以上*单向扩散试验上排为5个不同浓度的参考品；下排为患者血清，下排右2为异常病理血清一、单向免疫扩散试验*应用IgG、IgA、IgM、C3、C4、转铁蛋白、抗胰蛋白酶、糖蛋白和前白蛋白等多种血浆蛋白的检测*技术要点：1.制板2.打孔3.加样4.扩散二、双向免疫扩散试验***1.判断抗原或抗体的存在以及估计相对含量2.分析抗原或抗体相对分子量二、双向免疫扩散试验*3.分析抗原的性质二、双向免疫扩散试验**4.滴定抗体的效价5.鉴定抗原或抗体纯度二、双向免疫扩散试验*应用1.AFP检测的最早方法2.血清中含量较高的酶类、细菌病毒感染后血清中产生的抗体的检测*三、免疫电泳技术*优点：1.加快反应的速度。2.提高了灵敏度。3.增加了分辨率。电泳分析＋沉淀反应抗原抗体反应的高度特异性电泳技术的高分辨率、快速、微量三、免疫电泳技术*电泳（electrophoresis）：在外加电场的作用下带电颗粒向着其电性相反的电极移动，称为电泳。*电泳迁移率：定义：同一电场条件下，各种带电粒子在单位时间内移动的距离。M=cm2/VS影响泳动的速度的因素:本身净电荷量、颗粒大小、形状电场强度溶液pH值溶液离子强度电渗*电渗：电场中液体相对于固体的运动①载体的性质