TCVMA《鸽痘病毒荧光定量PCR检测技术》.pdf

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团体标准

T/CVMAXXXXX—XXXX

鸽痘病毒荧光定量PCR检测技术

Real-TimeFluorescentQuantitativePCRDetectionTechnologyforPigeon

PoxVirus

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

T/CVMAXXXXX—XXXX

鸽痘病毒荧光定量PCR检测技术

1范围

本文件规定了鸽痘病毒荧光定量PCR检测技术的内容、步骤、方法及注意事项的要求

本文件适用于鸽痘病毒或疑似鸽痘病毒感染样品的荧光定量PCR检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

《中华人民共和国动物防疫法》

《中华人民共和国生物安全法》

《病原微生物实验室生物安全管理条例》

《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》

《动物病原微生物实验活动生物安全要求细则》

《兽医实验室生物安全要求通则》（NY/T1948-2010）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

鸽痘病毒pigeonpoxvirus

属于痘病毒科（Poxviridae）禽痘病毒属（Fowlpoxvirus）成员，为双链DNA病毒。主要感染鸽科鸟

类，通过节肢动物媒介或直接接触传播，引起鸽痘症状。临床特征为皮肤无毛处形成增生性结节，口腔

及呼吸道黏膜出现白喉样假膜病变。

3.2

禽痘病毒Fowlpoxvirus

属于痘病毒科（Poxviridae）禽痘病毒属（Fowlpoxvirus）成员，为双链DNA病毒。主要感染禽类（如

鸡、鸽、火鸡等），通过节肢动物媒介（如蚊、蜱）或直接接触传播，引发禽痘症状。临床特征为皮肤

无毛区域增生性结节、结痂，口腔及上呼吸道黏膜白喉样假膜病变，严重时可导致生长迟缓或死亡，对

禽类养殖业具有重要经济影响。

3.3

荧光定量PCRFluorescenceQuantitativePolymeraseChainReaction

2

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一种基于实时荧光信号监测的核酸扩增技术，通过荧光染料或序列特异性探针标记靶标DNA，动态

检测扩增过程中荧光强度的变化，结合标准曲线或阈值循环数（Ct值）对初始模板核酸进行定量分析。

该方法具有高灵敏度和特异性，广泛应用于病原体检测、基因表达分析等领域。

4符号和缩略语

下列符号和缩略语适用于本文件。

PCR：聚合酶链式反应。

Ct值：PCR扩增过程中扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数。

FPV：禽痘病毒

PGPV：鸽痘病毒

5原理

禽痘病毒（FPV）核心蛋白4b具有很好的种属特异性和抗原保护性，生物信息学筛选出该基因在PGPV

中保守且能够区别于其他APV的序列片段序列，利用该序列设计引物和探针，根据鸽痘病毒荧光定量PCR

检测结果对PGPV进行检测鉴定。

6组织或拭子样品采集

6.1组织样品

用无菌镊子或剪刀采集皮肤