DB13T 1415-2011 鱼类寄生虫性疫病诊断技术规程.docxVIP

ICS65.150B52

DB13

河北省地方标准

DB13/T1415—2011

鱼类寄生虫性疫病诊断技术规程

Diagnosisprotocalforparasiteepidemicsoffish

2011-06-15发布2011-06-30实施

河北省质量技术监督局发布

I

DB13/T1415—2011

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由河北省水产局提出。

本标准起草单位：河北省水产养殖病害防治监测总站。

本标准主要起草人：张志华、侯金良、李同庆、康辰香、孙伟彬、石洁卿、马瑞欣、邵铁凡、寇景莲。

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鱼类寄生虫性疫病诊断技术规程

1范围

本标准规定了鱼类寄生虫性疫病即小瓜虫病、刺激隐核虫病、粘孢子虫病、三代虫病、指环虫病的诊断技术。

本标准适用于小瓜虫病、刺激隐核虫病、粘孢子虫病、三代虫病、指环虫病的诊断。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

OIE《水生动物疾病诊断手册》

3通则

3.1材料和试剂

3.1.1材料

普通光学显微镜、双筒解剖镜、放大镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术刀、手术剪、解剖针、吸水纸、培养皿、滴管、解剖盘等。

3.1.2试剂

0.85％生理盐水、30‰人工配制海水、4％～5%和10％的福尔马林、70％酒精、硝酸银、甘油胶胨、肖氏液、聚乙烯醇。

配置试剂用水应符合GB/T6682的要求。

3.2采样量

用于检查诊断的鱼应有一定数量，检查时采集的样品至少5尾~10尾。也可按照OIE《水生动物疾病诊断手册》的采样方法进行采样，见附录A。

3.3样品及运输

用于实验室检查的病鱼应是活体，运输时应在采集的病鱼中加注原池水进行活体运输。每个容器只装运同一种病鱼送至实验室。运输过程中应采取充氧、降温等措施。

3.4病原体记数

按不同感染部位采集组织，进行观察。记录显微镜检查时的倍数和该倍数下的虫体数量。孢囊用数字说明，虫体数为同一玻片中3个视野的平均数。

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4小瓜虫病

4.1病原种类特征见附录B。

4.2现场样品目检

检查鱼体。病鱼体色发黑，消瘦，游动异常，体表或鳃上可见1mm左右的小白点，病情严重时，鱼体表伴大量粘液，用镊子刮下白点或粘液，放在解剖盘上，滴一滴生理盐水，静置1min～2min，在光亮的地方仔细观察，如果见到一个个白色小圆球在慢慢地游动，且大多数集中在水滴的边缘，根据上述的症状可以初步确诊。

4.3实验室检测及标本保存

4.3.1体表

用解剖刀刮取体表两侧粘液，置于载玻片上，滴一滴生理盐水，用镊子将组织粘液分散，盖上盖玻片，用拇指轻轻压片，在显微镜或解剖镜下检查。

4.3.2鳍

目检正常的鱼，剪下各鳍，置于载玻片上，滴一滴生理盐水，解剖镜下检查。

目检鱼体各鳍如有溃烂或白点，用镊子刮取溃烂或白点部位，置于载玻片上，滴一滴生理盐水，用盖玻片盖上轻压，解剖镜或显微镜下检查。

4.3.3鳃

用剪刀将左右两边的鳃完整地取出，放在培养皿里（要分开放置），并附上左右标记。剪取一小块鳃组织（应从每一边鳃的第一片鳃片接近两端的位置剪取），放在载玻片上，滴一滴生理盐水，盖上盖玻片轻压，在解剖镜或显微镜下检查。

如鳃上肉眼可见白点或孢囊，则用镊子刮取白点或孢囊，或取整片鳃丝压片，显微镜下检查。

4.3.4虫体收集保存

见附录C。

4.4结果判定

目检症状结合镜下观察，40倍显微镜下平均每视野内小瓜虫计数达到10个及10个以上时，判定为小瓜虫病；小瓜虫计数不足10个时，判定为小瓜虫感染。

5刺激隐核虫病

5.1病原种类特征见附录B。

5.2现场样品目检

滴加试剂为30‰人工配制海水，其他步骤同4.2。

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5.3实验室检测及标本保存

诊断时滴加试剂为30‰人工配制海水，其他步骤同4.3。

5.4结果判定

目检症状结合镜下观察，40倍显微镜下平均每视野内刺激隐核虫计数达到10个及10个以上时，判定为刺激隐核虫病；刺激隐核虫计数不足10个时，判定为刺激隐核虫感染。

6粘孢子虫病

6.1病原种类特征见附录B。

6.2现场样品目检

粘孢子虫的多数种类，寄生