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纤维素酶生产菌株的筛选与产酶特性研究以及基因克隆表达

目录

纤维素酶生产菌株的筛选与产酶特性研究以及基因克隆表达（1）．．3

一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景及意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2研究目的和内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3研究方法和技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

二、纤维素酶生产菌株的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1纤维素酶产生菌株的初步筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.2纤维素酶活性测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.3筛选结果及其分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

三、产酶特性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

3.1培养条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

3.2纤维素酶的热稳定性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.3纤维素酶的米氏常数．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

3.4纤维素酶的pH值适应性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

四、基因克隆表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

4.1纤维素酶基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

4.2表达载体的构建与转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

4.3表达产物的鉴定与功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

五、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

5.1研究成果总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

5.2存在问题与不足．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

5.3未来研究方向与应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

纤维素酶生产菌株的筛选与产酶特性研究以及基因克隆表达（2）．28

一、内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

1.1纤维素酶的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

1.2筛选高效生产菌株的意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

1.3产酶特性研究及基因克隆表达的价值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

二、纤维素酶概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.1纤维素酶的定义与性质．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.1.1纤维素酶的概念．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.1.2纤维素酶的理化性质．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.2纤维素酶的来源与分类．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

三、纤维素酶生产菌株的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

3.1筛选原理与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.1.1基于产酶能力的筛选原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.1.2筛选方法与技术手段．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.2筛选流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

3.2.1样品采集与预处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.2.2初步筛选与复筛．．．．．．．．．．．．．．．．