生化基础知识-比色法.pptxVIP

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比色法原理(分光光度法)

多么美丽五彩斑斓的春天啊

为什么上述溶液呈现不同的颜色?

自然光-赤橙黄绿青蓝紫

波长决定颜色

光谱-连续不同波长光的集合

物质对不同波长光的选择性吸收

单色光互补光复色光由于物质对不同波长光的选择性吸收而引起,物质呈现的是被吸收颜色的互补色。

现在知道她的秘密了吗?

设计总结汇报脑筋急转弯1、红光照射红色溶液,看透过什么色?2、红光照射绿色溶液,看透过什么色?

透光度(透射比)Transmittance透光度定义:T取值为0.0%~100.0%全部吸收T=0.0%全部透过T=100.0%吸光度定义:

T、A与颜色的关系---------------------透光率(T)吸光度(A)---------------------10.0000.750.1250.50.3010.250.6020.170.7700.11.0000.051.3010.012.0000.0013.000---------------------?

测量物质光吸收的装置-比色计

比色计或分光光度计

物质的光吸收曲线-定性分析

吸光度与光径的关系

吸光度与浓度的关系

朗伯-比尔定律:A=-lgT=KCL

透光度(transmittance,T,透射率)T=It/I0吸光度(absorbance,A)光密度(opticaldensity,D或OD)A=-lgT=lgI0/ItLamb-beer定律:A=KCLK为吸光系数,C为浓度,L为光径cm摩尔吸光系数ε:当C=1mol/L,L=1cm,A=ε

比色定量——与标准浓度物质溶液比较

目视比色法空白c1c2c3c4观察方向

比色计或分光光度计

比色法成立的基础有色或有吸收单色光

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