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关于实验除草剂与杀菌剂毒力测定第1页,共17页,星期日,2025年,2月5日利用有害生物(靶标生物,如昆虫、螨类、病菌、线虫、杂草等)对作用物的反应评价化合物生物活性的基本方法---陈年春“农药生测技术”农药生测现在已发展成为是集昆虫学、植物病理学、微生物学、植物学、杂草学、化学、生物技术、统计学等多学科于一体的综合技术,是农药科技创新工程中不可或缺的关键技术。农药生测技术内涵第2页,共17页,星期日,2025年,2月5日生理活性物质靶标生物虫、草、菌等反应程度生物测定已成为研究作用物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术第3页,共17页,星期日,2025年,2月5日杀菌剂的毒力测定第4页,共17页,星期日,2025年,2月5日杀菌剂生物测定流程药剂毒力测定;定性定量分析;防治效果测定;第5页,共17页,星期日,2025年,2月5日杀菌剂室内生物测定主要方法孢子萌芽测定法:观察供试病菌孢子是否萌发,来判定杀菌剂毒力大小;生长速率法:将不同浓度的药液与溶化的培养基混合,制成带毒培养基平面,在平面上接种病原菌,以其生长速度快慢判定药剂毒力大小。第6页,共17页,星期日,2025年,2月5日将不同浓度的药液和热的培养基混合,用这种含药培养基培养病原菌,以病原菌的生长进度的快慢来判定药剂毒力的大小。生长速率法原理菌饼(菌碟)含药培养基生长速率法示意图注意事项:应先加药液再加培养基(1:9);对一些受热易分解的药剂则要待培养基冷却到50度左右时再加入。第7页,共17页,星期日,2025年,2月5日优点:①操作比较简单;②适用范围广,适用于乳油、水剂、可湿性粉剂等;③重复性好,只要操作认真,均可得到可靠的结果。生长速率法的优缺点缺点:①对供试菌种要求较严格,病菌要易于培养,生长较快且边缘整齐、产孢子缓慢,而且是农业生产上重要的病原菌;②对供试药剂要求,有一定的耐热性,遇热不易分解。第8页,共17页,星期日,2025年,2月5日多菌灵(carbendazim)对小麦赤霉病菌的毒力测定供试菌株:小麦赤霉病菌(Fusariumgraminerarum)敏感菌株2021和抗性菌株JT04。2021JT04试验目的:掌握生长速率法测定杀菌剂毒力。第9页,共17页,星期日,2025年,2月5日供试药剂:98%多菌灵原药,由江苏龙灯化学有限公司提供。多菌灵用0.1MHCl分别配成10000μg/mL、100μg/mL母液。剂量设置:1.测定敏感菌株2021,取一定量的100μg/mL母液多菌灵母液,加入到50mLPSA中,每个处理3个重复。2.测定多菌灵抗性菌株JT04:药剂浓度为:0(对照)、1.25、2.5、5、10、20、40μg/mL,取400μL10000μg/mL母液,加入到100mLPSA中,即得40μg/mL,然后梯度稀释,每个处理3个重复。药剂浓度(μg/mL)0(CK)0.20.40.60.81母液体积(μL)0100200300400500第10页,共17页,星期日,2025年,2月5日(1)制备含药培养基:准确取一定量的药液加入到热的培养基中,混匀,倒入灭菌的培养皿中,待冷凝后即为含药培养基;(2)制备菌饼:用无菌的打孔器在供试菌种边缘打下菌块即菌饼(在无菌条件下进行);(3)移植菌饼:用接种针将菌饼(有菌丝的一面向上)移植到含药培养基平板的中央,一个培养皿接一个菌饼;(4)测定菌落直径:25℃培养3天,取出培养皿测量菌落直径。每个菌落十字交叉测两次直径,取平均值。操作步骤第11页,共17页,星期日,2025年,2月5日数据处理将抑制率换算成机率值,作为Y;将药剂的剂量数值换算成对数值,作为X,直线回归,求出毒力回归方程Y=a+bx,计算EC50。抑制率=对照菌落直径–处理菌落直径对照菌落直径–菌饼直径×100%注:菌饼直径为5mm第12页,共17页,星期日,2025年,2月5日
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