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pcr核酸检测考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR的中文名称是（）

A.聚合酶链反应B.核酸序列测定C.基因克隆D.蛋白质印迹

答案：A

2.在PCR反应中，哪种酶起到关键作用（）

A.逆转录酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.连接酶

答案：B

3.PCR反应的三个基本步骤不包括（）

A.变性B.退火C.延伸D.转录

答案：D

4.一般PCR反应中，变性温度通常为（）

A.90-95℃B.70-75℃C.50-55℃D.30-35℃

答案：A

5.以下哪种物质不是PCR反应的必需成分（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.核糖体

答案：D

6.PCR引物的长度一般为（）

A.5-10个核苷酸B.15-30个核苷酸C.50-100个核苷酸D.100-200个核苷酸

答案：B

7.为了避免引物之间形成二聚体，引物设计时应注意（）

A.引物长度B.引物的GC含量C.引物自身不能互补D.以上都是

答案：D

8.在PCR产物分析中，琼脂糖凝胶电泳中，哪种物质可以使DNA显色（）

A.溴化乙锭B.考马斯亮蓝C.碘液D.双缩脲试剂

答案：A

9.如果PCR反应没有得到预期的产物，可能的原因不包括（）

A.引物设计错误B.模板量过多C.反应体系中酶失活D.反应温度过高导致DNA彻底降解

答案：D

10.对于微量模板的PCR扩增，以下哪种方法可以提高扩增效率（）

A.增加循环次数B.增加引物浓度C.增加模板量D.降低退火温度

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可应用于以下哪些方面（）

A.疾病诊断B.基因克隆C.法医学鉴定D.遗传疾病检测

答案：ABCD

2.以下哪些因素会影响PCR反应的特异性（）

A.引物特异性B.退火温度C.Mg2+浓度D.模板纯度

答案：ABCD

3.在PCR反应体系中，dNTP的作用包括（）

A.提供合成DNA的原料B.影响反应的特异性C.影响反应的效率D.作为缓冲物质

答案：AC

4.以下属于PCR衍生技术的有（）

A.反转录PCRB.实时荧光定量PCRC.巢式PCRD.多重PCR

答案：ABCD

5.PCR反应中，模板DNA可以来源于（）

A.基因组DNAB.质粒DNAC.cDNAD.线粒体DNA

答案：ABCD

6.设计PCR引物时，需要考虑的因素有（）

A.引物长度B.引物的GC含量C.引物的特异性D.引物与模板的互补性

答案：ABCD

7.关于PCR反应中的退火过程，下列说法正确的是（）

A.引物与模板结合B.温度通常低于引物的Tm值C.退火温度过高会影响引物与模板的结合D.退火温度过低可能导致非特异性结合

答案：ABCD

8.在PCR实验操作中，防止污染的措施有（）

A.严格分区操作B.使用一次性耗材C.定期对实验室进行清洁和消毒D.实验人员规范操作

答案：ABCD

9.以下关于PCR产物分析的说法正确的是（）

A.琼脂糖凝胶电泳可用于分析PCR产物的大小B.聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨率更高C.测序可以确定PCR产物的序列准确性D.酶切分析可用于检测PCR产物中的特定序列

答案：ABCD

10.在实时荧光定量PCR中，常用的荧光标记方法有（）

A.染料法B.探针法C.放射性标记法D.化学发光法

答案：AB

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR可以在体外无限扩增任何DNA片段。（×）

2.引物的3端与模板DNA严格互补配对对于PCR成功至关重要。（√）

3.PCR反应中，dNTP浓度越高越好。（×）

4.只要有合适的引物，任何来源的DNA都可以作为PCR的模板。（×）

5.实时荧光定量PCR只能用于检测DNA。（×）

6.在PCR反应中，变性时间越长越好。（×）

7.巢式PCR可以提高PCR反应的特异性和灵敏度。（√）

8.所有的DNA聚合酶都适合用于PCR反应。（×）

9.PCR反应体系中不需要缓冲液。（×）

10.琼脂糖凝胶电泳中，DNA分子越大，迁移速度越快。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

答案：PCR是一种体外模拟体内DNA复制过