血型检查方法学评价及其质量控制.pptVIP

血型检查方法学评价及其质量控制第1页，共35页，星期日，2025年，2月5日血型概述血型是人类血液以血型抗原为表现型的遗传性状，ABO血型系统和Rh血型系统是红细胞的两大血型抗原抗体系统，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。血型鉴定(bloodtyping)是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。第2页，共35页，星期日，2025年，2月5日主要内容ABO血型系统ABO血型系统抗原ABO血型系统抗体ABO血型系统亚型ABO血型鉴定检测原理鉴定方法方法学评价质量控制RH血型系统RH血型系统抗原RH血型系统抗体RH血型鉴定检测原理鉴定方法方法学评价质量控制第3页，共35页，星期日，2025年，2月5日ABO血型系统抗体分为天然抗体和免疫性抗体天然抗体主要为IgM型免疫球蛋白免疫性抗体则来自母婴血型不合的妊娠或血型不合的输血，通常是来自母体的IgG型免疫球蛋白。第4页，共35页，星期日，2025年，2月5日ABO血型系统抗体两种抗体的比较特性IgM型IgG型分子量（kD）1000160耐热性（70℃）破坏稳定与红细胞结合最适温度（℃）4-2537与红细胞反应介质生理盐水酶处理或清蛋白溶液被血型物质中和能不能通过胎盘不能能第5页，共35页，星期日，2025年，2月5日ABO血型系统亚型A抗原的主要亚型有A1和A2，均能与抗A血清发生直接凝集反应。AB血型中也存在相应的A1B和A2B亚型。B亚型较少见，且抗原性弱，故临床意义不大。第6页，共35页，星期日，2025年，2月5日ABO血型检测原理血型抗原与相应抗体在反应介质中形成红细胞和相应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝集现象。正向定型（directtyping）反向定型（indirecttyping）第7页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法血凝试验玻片法试管法全自动微板法流式细胞技术酶联免疫吸附试验微柱凝胶试验第8页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法盐水凝集法（saltmediumtest）第9页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法正定型，玻片法第10页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法玻片法评价它是目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法。具有操作简便，节省材料的优点。但弱凝集反应需要借助显微镜观察确定。第11页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法反定型，试管法第12页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法试管法评价——优点试管法是交叉配血试验中最基础的试验方法之一。与玻片法原理相同，但是借助试管更大的反应空间，并对待测红细胞予以一定的浓度的稀释或者加入更多的待测红细胞，通过低速离心后可根据有无肉眼可见凝集反应来判断结果。由于待测红细胞经过稀释，在一定程度上减少了血液中非特异性抗体的浓度，从而提高了试验的敏感性。比玻片法更具有准确可靠的优点。第13页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法试管法评价——缺点只能检测出完全抗体（抗A、抗B）引起的血型不合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出，有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。本实验中的生理盐水对血清（浆）中的抗体有稀释作用，易导致配血结果假阴性。易受冷凝集素的干扰。第14页，共35页，星期日，2025年，2月5日方法学评价盐水凝集法操作简便，无需特殊仪器。玻片法：无需离心，适用于血型普查。但反应时间长，灵敏度差，凝集较弱时易导致定型错误。不适于反向定型。试管法：用离心法加速反应，所需时间短，适于急诊定型。因离心增强红细胞凝集，可发现较弱的凝集现象，有助于检出亚型，故为常用血型鉴定方法。只能检测完全抗体易受冷凝集素干扰第15页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法凝胶微柱法第16页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法凝胶微柱法的结果第17页，共35页，星期日，2025年，2月5日方法学评价凝胶微柱法重复性好，特异性和灵敏度高，结果准确。试剂成本较高，需用离心设备。根据不同需要可选用中性凝胶、特异凝胶或抗球蛋白凝胶作为反应介质。结果既可肉眼观察，也可用血型分析仪分析。第18页，共35页，星期日，2025年，2月5日鉴定方法全自动微板法标准化加样、孵育、离心、悬浮、静止反应前后吸光度值增加数值的计算对血型进行正定型与反定型第19页，共35页，星期日，2025年，2月