核酸杂交技术.docx

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核酸杂交技术

由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的根本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其根本原理是具有肯定同源性的原条核酸单链在肯定的条件下〔适宜的温室度及离子强度等〕可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针〔probe〕,待测核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的,能与特定的核酸序列发生特异性互补的DNA或RNA片段。依据其来源和性质可分为cDNA探针、基因组探针、寡核苷酸探

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