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编号：3-5

：荧光原位杂交技术（Fluorescenceinsituhybridization,FISH）

概述：

原位杂交技术是以分子碱基互补配对的原理为基础的实验技术。通过标记的

分子（探针，Probe）与目标分子杂交，再用相应的方法检测探针的存在，从而

揭示靶部位目标分子的位置。最早的原位杂交技术出现于1969年，Gall和Pardue

早期的原位杂交技术使用性标记，存在诸多弊端。1985年Rayburn等首次将生

物素（Biotin）标记的重复序列定位到小麦的中期相上（RayburnGill,1985），

开创了非性标记的杂交技术。由于非性标记的原位杂交技术具有安全、经济、

灵敏度高等优点，因而迅速发展起来。

荧光原位杂交技术（Fluorescenceinsituhybridization,FISH）是指利用荧光信号检

测探针的原位杂交技术。广义上讲，FISH靶序列可以是或者RNA，既可以用来

进行组层面的研究，也可以进行表达层面的研究。

目的：

用于定性、定量、整合、表达等方面的研究。

原理：

FISH技术的基本原理是基于分子碱基配对的原则，将或细胞核与探

针分别变性后，将探针杂交至靶部位，然后使用荧光显微镜检测杂交信号。探针可以

直接用荧光物质标记（直接法），也可以使用一些抗原物质标记，然后采用荧光标记

的抗体与探针上的标记物结合（间接法）。相对而言，间接法荧光原位杂交相对应用

更广。

步骤：

1.FISH样本的

2.探针的

3.探针标记

4.杂交

5.显带

6.荧光显微镜检测

7.结果分析

流程图：