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ICS65.020.40
DB51
B61
四川省地方标准
DB51/T2406—2017
重点保护野生动物(偶蹄目、奇蹄目)DNA
条形码司法鉴定技术规范
四川省质量技术监督局
发布
DB51/T2406—2017
目
次
前言...............................................................................II
1
2
3
4
5
6
7
8
范围..............................................................................1
规范性引用文件....................................................................1
术语、定义和缩略语................................................................1
原理..............................................................................2
扩增引物..........................................................................2
DNA的提取与检测...................................................................2
PCR反应与PCR产物测序.............................................................3
数据分析和种类鉴定................................................................3
I
DB51/T2406—2017
前
言
本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则》的规定编写。
本标准由四川省林业厅提出并归口。
本标准由四川省质量技术监督局批准。
本标准主要起草单位:四川省林业科学研究院。
本标准主要起草人:靳伟毛毳费然夏云刘雯昊。
II
DB51/T2406—2017
重点保护野生动物(偶蹄目、奇蹄目)DNA条形码司法鉴定技术规范
1范围
本标准规定了利用DNA条形码对重点保护野生动物(偶蹄目、奇蹄目)进行司法鉴定的原理、试剂、
仪器、分析步骤和结果判定标准。本标准适用于重点保护野生动物(偶蹄目、奇蹄目)DNA鉴定等方面
的物种鉴定工作。
2
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GA/T383-2002
SN/T1193-2003
SN/T4625-2016
SN/T4626-2016
法庭科学DNA实验室检验规范
基因检验实验室技术要求
DNA条形码筛选与质量要求
DNA条形码物种鉴定操作规程
下列术语和定义适用于本文件。
DNA条形码是利用生物体内一段标准的、有足够变异的、易扩增且相对较短的DNA片段对物种进行
快速准确鉴定的技术。在动物中,通常选择细胞色素c氧化酶亚基I(COI)作为标准的DNA片段。
一段位于线粒体基因组上的蛋白编码基因,其基因的一部分通常选作动物DNA条形码鉴定的标准片
段。
用一对寡核苷酸引物、四种脱氧核糖核苷酸(dNTPs)为原料,在合适的温度、离子条件和耐热DNA
聚合酶催化下,在体外人工合成特异的DNA片段的过程。
DNA序列测定DNAsequencing
1
DB51/T2406—2017
3.5
序列比对alignment
为确定两个或多个序列之间的相似性以至于同源性,而将他们按照一定的规律排列。
4原理
DNA条形码的理念来源于现代商品零售业条形编码系统。它利用DNA序列信息量大的优势,即每
个碱基位点有A、T、G、C四种可能的情况,以一种四进制的方式进行排列组合。利用这种DNA序列排列
组合方式在物种间的差异,可以有效的将物种区分开。线粒体COI基因是位于线粒体DNA的蛋白质编码基
因。经大量的统计分析后,COI序列5’端的658bp的碱基序列能有效反应物种间差异,并且该段基
因易于扩增,进化速度较快同时又相对保守,既有足够的变异又便于通用引物扩增,DNA序
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