红细胞目镜计数法.pptx

红细胞目镜计数法

演讲人：

日期:

目录

02

实验准备

01

基本原理

03

操作步骤

04

结果处理

05

注意事项

06

应用场景

01

基本原理

计数方法定义

01

红细胞目镜计数法

一种通过显微镜目镜对红细胞进行计数的方法。

02

计数原则

利用血细胞计数板上的特定区域，对红细胞进行逐一计数，并推算出总的红细胞数量。

血细胞计数板结构

血细胞计数板中央有一个特制的计数室，内部划分成若干个小方格，用于红细胞的计数。

计数室

盖在计数板上，保护计数室并使其保持一定的厚度，便于红细胞的计数。

盖玻片

位于计数室的边缘或底部，用于确定计数的范围和数量。

计数刻度

计算原理解析

红细胞数量推算

误差控制

稀释倍数计算

通过计数一定体积内的红细胞数量，推算出整体样本中的红细胞数量。

如果样本中红细胞数量过多，可以进行适当的稀释，然后再根据稀释倍数计算原始样本中的红细胞数量。

通过多次计数、取平均值等方法，减少因操作、仪器等因素带来的误差，提高计数的准确性。

02

实验准备

显微镜：用于观察红细胞形态和数量。

微量移液器：用于精确吸取样本和试剂。

红细胞计数板：用于在显微镜下计数红细胞数量。

试管：用于存放样本和试剂。

盖玻片：用于覆盖计数板上的样本，避免样本蒸发或污染。

离心机：用于分离红细胞和血浆。

稀释液：用于稀释样本，以便更准确地计数红细胞。

器材与试剂清单

样本处理规范

样本采集

按照医生要求采集静脉血或末梢血，避免溶血或污染。

01

样本储存

将采集的样本放入试管中，避免阳光直射，尽快送至实验室。

02

样本处理

对样本进行适当处理，如去除血浆、白细胞等干扰物质。

03

样本稀释

根据红细胞数量，用稀释液将样本稀释至适当浓度。

04

稀释液配制要求

稀释液选择

稀释比例

配制方法

储存条件

选择与样本相容且不影响红细胞计数的稀释液。

根据样本中红细胞的数量和计数要求，确定适当的稀释比例。

按照稀释液说明书，精确量取所需稀释液和蒸馏水，混合均匀。

稀释液应存放在阴凉、干燥、避光处，避免污染和变质。

03

操作步骤

计数板清洁与校准

使用无水乙醇或专用清洁剂将计数板清洗干净，然后用绸布擦干。

清洗计数板

在显微镜下，用标准微球溶液校准计数板，确保每个小方格内微球数量准确无误。

校准计数板

校准后，需再次检查计数板是否干净、无划痕，以确保计数准确性。

计数板检查

样本加载与分布技巧

样本分布

加载样本后，轻轻晃动计数板，使红细胞在计数区域内均匀分布，避免聚集和重叠。

03

用吸管吸取适量红细胞悬液，滴在计数板上，使其自然渗入并覆盖计数区域。

02

样本加载

样本制备

将红细胞悬液轻轻摇匀，使红细胞分布均匀。

01

显微镜调试

按照特定计数区域进行计数，通常选择红细胞分布均匀、无重叠的区域进行计数。

计数规则

计数方法

采用“数上不数下，数左不数右”的计数原则，对每个小方格内的红细胞进行逐一计数，然后计算总数。同时，需注意记录异常红细胞形态和数量。

调节显微镜的焦距和光线，使红细胞图像清晰可见。

显微镜观察与计数规则

04

结果处理

数据记录格式标准

计数板记录

平均值计算

样本信息记录

质量控制记录

记录每个计数板的红细胞数，包括所有大方格内的细胞数。

计算所有计数板红细胞数的平均值，作为样本的红细胞浓度。

记录样本的采集时间、部位、患者信息等，以便后续分析和比对。

记录计数过程中的异常情况、重复计数结果等，确保数据的可靠性。

由于人为因素或计数板质量问题导致的误差，可通过重复计数和校准计数板来修正。

由于红细胞在样本中分布不均匀，导致计数结果偏高或偏低，可通过充分混匀样本来减小误差。

由于患者失水或输液等原因，导致红细胞浓度发生变化，应根据实际情况进行修正。

计数板上有污渍或杂质会干扰红细胞的计数，应定期清洁计数板，确保计数准确性。

误差来源与修正方法

计数误差

样本分布不均

血液浓缩或稀释

计数板清洁度

浓度计算公式应用

红细胞浓度（RBC）

通过计数得到的红细胞数除以样本体积，得到红细胞浓度。

红细胞比容（HCT）

红细胞比容是红细胞在血液中所占的体积百分比，可通过红细胞浓度与平均红细胞体积计算得出。

血红蛋白浓度（Hb）

血红蛋白浓度是红细胞内血红蛋白的含量，可通过红细胞浓度与平均红细胞血红蛋白含量计算得出。

红细胞相关参数

根据红细胞浓度、红细胞比容和血红蛋白浓度等参数，可计算出红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）和红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）等参数，用于贫血的鉴别诊断。

05

注意事项

操作污染防控措施

使用无污染、无溶血的样品，避免样品受到外部污染。

样品处理

保持实验室干净整洁，定期进行消毒，操作前需洗手。

实验室环境

操作时需佩戴手套和口罩，避免交叉污染。

操作过程

常见误差规避