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- 2025-06-17 发布于广西
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?-氨基参加的反应;
(1)与亚硝酸反响
;(2)与酰化试剂反响;与2,4-二硝基氟苯的反响;氨基酸与2,4-二硝基氟苯的反响的应用
---多肽链N-末端氨基酸残基的鉴定;与异硫氰酸苯酯的反响;氨基酸与异硫氰酸苯酯的反响的应用
--多肽链N-末端氨基酸残基的鉴定〔Edman法〕;(4)形成西佛碱反响
?;;氨基酸虽然是两性电解质,既是酸又是碱,但却不能直接用酸碱滴定来进行定量。这是因为氨基酸的酸碱滴定的滴定终点PH值或过高或过低没有适当的指示剂可供选用。然而向氨基酸例如甘氨酸溶液中参加过量的甲醛,用标准氢氧化钠滴定时,由于甲醛与氨基酸中的-NH3作用形成羟甲基和二羟甲基氨基酸等羟甲基衍生物,促使氨基酸分子上的-NH3+基解离释放出H+,从而降低了氨基的碱性,使溶液的酸性增强,使pKa2减少了2-3个PH单位,pKa2移至7附近。氢氧化钠滴定曲线B段向低PH值的方向转移〔变成曲线C段〕,;?
〔1〕成盐和成酯反响;〔2〕成酰氯反响;〔3〕脱羧基反响;2.6.3α-氨基和α-羧基共同参加的反响;2.7氨基酸混合物的分析别离
;分类;别离的先决条件:各种AA成分的分配系数有差异,差异越大,越容易分开。而且其在流动相中分配系数越大其别离的越快。;〔1〕纸层析;★在流动相中分配系数越大,移动越快。;纸层析小实验动画演示;〔2〕薄层层析
将支持剂〔硅胶、纤维素粉等〕涂布在玻璃板上制成均匀的薄层。
分辨率高,所需样品极微,层析速度快。;〔3〕柱层析;2.7.2离子交换层析;别离氨基酸混合物经常使用强酸型阳离子〔阳离子交换树脂〕交换树脂。
氨基酸在树脂上的牢固程度,主要取决于他们之间的静电吸引,其次是氨基酸侧链与树脂基质聚苯乙烯之间的疏水作用。
在pH3左右,氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引力的大小次序是:
碱性氨基酸〔A2+〕>中性氨基酸(A+)>酸性氨基酸〔A-〕。
洗脱氨基酸的有效方法是:
逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度〔离子强度〕。;、高效气相色谱
层析系统固定相为涂渍在固体颗粒外表的液体,的流动相为气体如氢,氦、氮,称为气液层析或气液色谱(gas—liquidchromatography),简称气相层析或气相色谱。
待分析的样品被气化,气化了的样品将在流动的气相和固定的液体之间发生分配而被别离。被分开的组分和载气直接进入检测器。
气相层析法具有微量快速的优点,限制是要求样品能气化和热稳定性高。;、高效液相色谱
高效液相层析(highperformanceliquidchromatography,简称HPLC)
曾称高压液相层析(highpressureliquidchromatography)。特点是:
①使用的固定相支持剂颗粒很细,因而外表积很大;②溶剂系统采取高压,因此洗脱速度增大。
多种类型的柱层析都可用HPLC来代替,例如分配层析、离子交换层析、吸附层析以及凝胶过滤。;层析分类;
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