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食品智能加工技术专业金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验山东药品食品职业学院
目录目录目录目录目录原理1材料仪器2方法步骤3报告4
原理原理原理原理原理致病性葡萄球菌大多能产生血浆凝固酶,在某些辅助因子的存在下,使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的兔血浆中纤维蛋白原变成不溶性的纤维蛋白,而使血浆凝固;非致病性球菌一般不产生此酶,因此,血浆凝固酶试验是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。
材料仪器材料仪器材料仪器材料仪器1.菌种斜面/平板培养物(含阳性、阴性对照菌株)。2.试剂冻干兔血浆、BHI肉汤、营养琼脂。3.仪器和用具生化培养箱、接种环、红外线灭菌器、火柴、试管等。
方法步骤方法步骤方法步骤方法步骤方法步骤1.BHI肉汤培养(1)挑取Baird-Parker平板或血平板上至少5个可疑菌落(小于5个全选),分别接种到5mLBHI肉汤和营养琼脂小斜面,36℃±1℃培养18h~24h。
方法步骤方法步骤方法步骤方法步骤方法步骤2.凝固酶实验取新鲜配制兔血浆0.5mL,放入小试管中,或冻干兔血浆,再加入BHI肉汤培养物0.2mL~0.3mL,振荡摇匀,置36℃±1℃恒温箱或水浴箱内,每半小时观察一次,连续观察6h。
方法步骤方法步骤方法步骤方法步骤方法步骤3.对照与重复实验(1)同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。(2)结果如可疑,挑取营养琼脂小斜面的菌落到5mLBHI肉汤,36℃±1℃培养18h~48h,重复上述试验。
报告报告报告报告报告报告(1)判定:如呈现凝固(即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块)或凝固体积大于原体积的一半,被判定为阳性结果。阳性阴性
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