象甲科仓储害虫分子鉴别技术规程(征求意见稿）.pdf

ICSXXXXX.XX

XXX

T/xxxxxxxxx

四川省（宜宾市）团体标准

T/xxxxxxxxxxxx.x—2022

象甲科仓储害虫分子鉴别技术规程

Technicalregulationsformolecularidentifyingcommonstored-productpestsofwith

weevilsDNAbarcode

（征求意见稿）

2022-XX-XX发布2022-XX-XX实施

宜宾市市场监督管理局发布

T/xxxxxxxxxxxx.x—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由XXX提出并归口。

本文件起草单位：宜宾学院，成都市农林科学院。

本文件主要起草人：

II

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象甲科仓储害虫分子鉴别技术规程

1范围

本文件规定了象甲科仓储害虫分子鉴别技术规程的术语和定义、工作原理、仪器设备及试剂、DNA

条形码分子鉴定和结果判断的相关要求。

本文件适用于仓储象甲DNA条形码的测定、结果的比对分析和判定，属于害虫监测和防控。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

DNA条形码（DNAbarcodes）

生物体内一段短的、标准化的DNA片段，用于区分不同的物种.该片段在物种间有足够的变异、容

易进行PCR扩增。

3.2

COI基因（COIgene）

线粒体基因组的蛋白编码基因，全称为细胞色素c氧化酶亚基I(cytochromecoxidasesubunitI,CO

I),该片段在物种间有足够的变异、易进行PCR扩增且重复性好，被证实能对很多动物物种进行高效区

分，是进行DNA条形码分子鉴定的首选目的基因。

4工作原理

根据仓储象甲的DNACOI序列特征，应用DNA条形码分子鉴定技术对仓储象甲进行鉴定。通过

对一段标准化基因——线粒体COI序列的扩增和分析来实现对生物物种准确、快速鉴定的技术COI

基因在动物物种之间序列位点信息具有足够的差异性，且能被通用引物广泛扩增，能够成功地在DNA

水一平上区分动物物种。

5仪器设备及试剂

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5.1仪器设备

5.1.1高速冷冻离心机：最高转速≥20000rpm

5.1.2微量核酸浓度检测仪:吸光率精度≤0.002A（1mm光程）

5.1.3PCR扩增仪：反应体积10-100ul

5.1.4电泳仪:功率75w

5.1.5凝