DB54T 0449-2025藏猪副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌三重实时荧光定量PCR检测技术规范.pdfVIP

ICS65.020.30

CCSB41

54

西藏自治区地方标准

DB54/T0449—2025

藏猪副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸膜

肺炎放线杆菌三重实时荧光定量PCR检测

技术规范

2025-05-10发布2025-06-10实施

西藏自治区市场监督管理局  发布

DB54/T0449—2025

目次

前言II

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4缩略语1

5仪器和设备2

6试剂和耗材2

7样品采集和处理2

8核酸提取3

9三重实时荧光定量PCR检测3

10结果判定3

11生物安全措施4

附录A（规范性）培养基及溶液配置5

附录B（规范性）阳性质粒的构建6

附录C（规范性）荧光定量引物、Taqman探针名称及序列7

附录D（规范性）荧光定量PCR反应体系及条件8

I

DB54/T0449—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会提出并归口。

本文件起草单位：西藏农牧学院、江苏农牧科技职业学院、泰州市姜堰区三水街道畜牧兽医站、昌

都市畜牧总站。

本文件主要起草人：罗润波、封琦、吴双、朱勇、韦创创、朱善元、商鹏、郑凯毅、普布扎西、赵

红阳、李沛明、张辉、拜占春、韦明邦、李可欣、钟亚男、石斌。

II

DB54/T0449—2025

藏猪副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌三重实时

荧光定量PCR检测技术规范

1范围

本文件规定了藏猪副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌三重实时荧光定量PCR检测

方法的仪器和设备、试剂和耗材、样品采集和处理、核酸提取、三重实时荧光定量PCR检测、结果判定、

生物安全措施等要求。

本文件适用于藏猪肺部组织、鼻腔或上呼吸道气管分泌物中的副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸

膜肺炎放线杆菌的定性及定量检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

NY/T1948兽医实验室生物安全要求通则

SN/T4835实验室生物废