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聚乳酸发酵菌株基因工程优化与生产效率提升
目录
一、内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1.1聚乳酸的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.1.2发酵菌株优化的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
1.2.1聚乳酸生产技术进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
1.2.2发酵菌株基因工程改造概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
1.3.1研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
1.3.2主要研究内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
二、聚乳酸发酵菌株及发酵过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.1聚乳酸发酵菌种．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.1.1常用聚乳酸产生菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.1.2菌种筛选与保藏．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.2聚乳酸发酵过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
2.2.1发酵工艺流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
2.2.2关键发酵参数控制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
三、聚乳酸发酵菌株基因工程改造策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
3.1基因工程改造原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
3.1.1基因工程基本工具．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
3.1.2载体构建与转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
3.2聚乳酸合成途径关键基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
3.2.1丙酮酸脱氢酶复合体基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
3.2.2乙酰辅酶A羧化酶基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
3.2.3丙二酸单酰辅酶A转乙酰基酶基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
3.2.4异柠檬酸脱氢酶基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
3.2.5β酮戊二酸脱氢酶复合体基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
3.2.6苹果酸酶基因．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
3.3基因工程改造方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
3.3.1基因敲除技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
3.3.2基因过表达技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
3.3.3基因编辑技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
四、聚乳酸发酵菌株基因工程优化实例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
4.1菌株基因组测序与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51
4.1.1基因组测序方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
4.1.2基因组信息分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54
4.2关键基因改造实例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55
4.2.1丙酮酸脱氢酶复合体基因改造实例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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