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1.2.1.细胞培养工艺描述

1.2.1.1.细胞复苏

从工作细胞库（WorkCel，WCB）中取1支冻存的细胞，采用温水浴

法（35°C~37°C）解冻，并快速转移至装有9mlFL1培养基的离心管，室温下

100g离心5min，弃去上清，用预热的FL1培养基重悬细胞，转入125ml摇瓶，

培养体积为20ml，取0.5ml进行细胞密度和活率测定。FL1的培养基成份为CD

FortiCHO™Medium+6mMGlutaMAXSupplement+4µMMTX。摇瓶置于二氧化

碳培养摇床中培养，参数设置为温度：37.0°C，CO2浓度：8.0%，摇床转速：125

rpm。细胞复苏后可以接受的范围是：活细胞密度≥3.0×105cell/ml；活率≥80%。

1.2.1.2.摇瓶阶段种子扩培

复苏的种子细胞依次在125ml、500ml和2000ml的摇瓶中逐级扩大培养，

培养体积分别为20ml、80ml和400ml，培养基为FL1，培养温度37.0°C，CO2

浓度8.0%，摇床转速：125rpm，每级的培养天数3~5天。12