分子发光分析法.pptxVIP

InstrumentalAnalysis

Chapter11

分子发射光谱法

MolecularLuminescence-Fluorescence

0引言2分子荧光定量分析4荧光光谱法的特点及其干扰因素1分子发光的基本原理3荧光光谱仪5荧光光谱法在农业上的应用本章内容

分子发光按激发的模式分类：光致发光化学发光生物发光分子发光荧光磷光按光子能量分类：斯托克斯荧光(Stokes)：λexλem反斯托克斯荧光(Antistokes)：λexλem共振荧光(Resonance)：λex=λem荧光分子发光分析：依据物质分子吸收一定的能量跃迁到较高电子激发态后，在返回基态时有光谱辐射而建立的分子方法。

第一节分子发光的基本原理一、分子荧光及磷光光谱的产生1.1荧光及磷光的产生分子中电子能级、振动能级和转动能级示意图电子能级振动能级转动能级

单重态：如果分子中全部轨道里的电子都是自旋配对的，即s=0,分子的多重度=1,该分子体系处于单重态基态(S0):室温下，分子处于基态的振动能级。所有电子遵从能量最低原理、Pauli不相容原理和洪特规则。激发态:被激发后,能量变高,属非稳状态。单重态（S）三重态（T）基态S0第一电子激发态S1第二电子激发态S2三重态T1T2三重态：如果电子在跃迁过程中还伴随着自旋方向的改变，这时分子具有两个自旋不配对的电子洪特规则：处于分立轨道上的非成对电子，平行自旋要比成对自旋更稳定。Pauli不相容原理：分子中同一轨道所占据的两个电子必须具有相反的自旋方向，即自旋配对。

激发态→基态的能量传递途径电子处于激发态是不稳定状态，返回基态时，通过辐射跃迁(发光)和无辐射跃迁等方式失去能量；传递途径辐射跃迁荧光延迟荧光磷光内转移外转移系间跨越振动弛预无辐射跃迁激发态停留时间短、返回速度快的途径，发生的几率大，发光强度相对大；荧光：10-6～10-9s,第一激发单重态的最低振动能级→基态；磷光：10-4～10s；第一激发三重态的最低振动能级→基态；

No.3振动弛豫（VibrationalRelaxation,VR）在同一电子能级中，电子由高振动能级迅速转至该电子能级低振动能级，将多余的能量以分子振动能形式消耗掉一部分，这样的过程，称为振动弛豫。高振动能级→低振动能级发生振动弛豫的时间：10-12sNo.2No.1

第二电子激发态第一电子激发态三重态S2S1基态S0T1振动弛豫设处于基态单重态中的电子吸收波长为λ1和λ2的辐射光之后，分别激发至第二单重态S2及第一单重态S1。λ1λ2l2l1

内转换（InternalConversion，IC）当两个电子能级非常靠近,以致其振动能级有重叠时，发生电子由高能级以无辐射跃迁方式转移至低能级，相同多重态的两个电子态间的非辐射跃迁12345发生内转换的时间：10-13～10-11s【例】:高电子能能级→→低电子能级S2→→S1T2→→T1

第二电子激发态第一电子激发态三重态S2S1基态S0T1T2

受激分子与溶剂或其它分子相互作用发生能量转换,而使荧光或磷光强度减弱甚至消失的过程，也称“熄灭”或“猝灭”（quenching）。外转换（ExternalConversion，EC）01两个不同多重态之间的无辐射跃迁，如从S1到T1，该跃迁是禁阻的。但当不同多重态的两个电子能级有较大重叠时，处于这两个能级上的受激电子的自旋方向发生变化，即可通过自旋-轨道耦合而产生无辐射跃迁，该过程称为系间窜跃。不同多重态的两个电子能态间的非辐射跃迁系间窜跃（IntersystemConversion，ISC）02

第一电子激发态第二电子激发态三重态S2S1基态S0T1T2

荧光发射01荧光：分子中电子从单重激发态的最低振动能级在很短时间（10-9-10-6s）跃迁到基态各振动能级时所产生的光子辐射称为荧光。02荧光发射：产生荧光的过程03S1→→S004

第一电子激发态第二电子激发态三重态荧光S1基态S0T1T2S2

磷光发射从单重态（S）到三重态（T）分子间发生系间跨越跃迁后，再经振动弛豫回到三重态最低振动能层，最后，在10-4-10s内跃迁到基态的各振动能层所产生的辐射。

第一电子激发态第二电子激发态三重态磷光S2S1基态S0T1T2

S2S1S0T1吸收发射荧光发射磷光系间窜跃内转换振动弛豫能量l2l1l3外转换l?2T2内转换振动弛豫分子内的光物理过程

01固定测量波长(选最大发射波长),化合物发射的荧光(磷光)强度与照射光波长的关系曲线（图中曲线I）。1.荧光(磷光)的激发光谱曲线02激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子