DB43T 702-2012 饲料中氟喹诺酮的测定 高效液相色谱法.docxVIP

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B46

DB43

湖南省地方标准

DB43/T702—2012

饲料中氟喹诺酮的测定高效液相色谱法

Determinationoffluoroquinolonesinfeeds

Highperformanceliquidchromatographicmethod

2012-07-24发布

2012-12-10实施

湖南省质量技术监督局发布

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DB43/T702—2012

目次

前言 Ⅱ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3原理 1

4试剂与材料 1

5仪器与设备 2

6采样 2

7测定步骤 2

8结果计算 3

9检测方法灵敏度、准确度、精密度 3

附录A(资料性附录)氟喹诺酮高效液相色谱图 4

DB43/T702—2012

前言

本标准按GB/T1.1—2009的规则编制。

本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。

本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所、湖南省畜禽水产品质量检验检测中心。

本标准主要起草人：邓云波、隆雪明、谭美英、肖安东、胡保国、陈启友、陈福华、吴礼龙、匡光伟、李娜、魏群、曹峰。

I

DB43/T702—2012

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饲料中氟喹诺酮的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中氟喹诺酮类药物达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星高效液相色谱的测定方法。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料中氟喹诺酮类药物达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1—2005饲料采样

3原理

采用2%氨水水溶液提取试样中的达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星，混合型阴离子固相萃取柱净化，高效液相色谱(荧光检测器)测定，外标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682一级水的规定。

4.1氨水。

4.2磷酸。

4.3三乙胺。

4.4氢氧化钠。

4.5乙腈色谱纯。

4.6甲醇色谱纯。

4.72%氨水水溶液：取2mL氨水与98mL水混合均匀，使用前配制。

4.85.0mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠饱和溶液28mL,加水稀释至100mL。

4.90.03mol/L氢氧化钠溶液：取5mol/L氢氧化钠溶液0.6mL,加水稀释至100mL。4.1050%甲醇溶液：取50mL甲醇与50mL水混合均匀。

4.110.05mol/L磷酸/三乙胺溶液：取磷酸3.4mL,用水稀释至1000mL,用三乙胺调pH至2.4。

4.12流动相：0.05mol/L磷酸/三乙胺溶液+乙腈=17+83。

4.13微孔滤膜：0.22μm,有机膜。

4.14SPE柱(混合型阴离子固相萃取柱):100mg/3mL。

4.15达氟沙星对照品：含达氟沙星应大于99.0%。

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DB43/T702—2012

4.16恩诺沙星对照品：含恩诺沙星应大于99.0%。

4.17环丙沙星对照品：含环丙沙星应大于99.0%。

4.18沙拉沙星对照品：含沙拉沙星应大于99.0%。

4.19标准储备液的配制：分别精密称取对照品适量(达氟沙星对照品约10mg,恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星对照品各约50mg),用0.03mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释成达氟沙星0.2mg/mL,恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星1mg/mL的标准储备液。置于(2～8)℃冰箱中保存，保存期不超过3个月。

4.20标准工作溶液的配制：准确移取标准储备液，用流动相稀释分别配成恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5μg/mL,达氟沙星为0.001、0.002、0.004、0.01、0.02、0.04、0.1μg/mL的标准工作液。

5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪：配有荧光检测器。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.001g。

5.3固相萃取装置。

5.4离心机。

5.5超声波清洗机。

5.