3.1重组DNA技术的基本工具课件-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

石家庄市第十五中学张姗姗3.1重组DNA技术的基本工具

1944年艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物个体间转移。1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至1966年，64个密码子均被破译成功。1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性内切核酸酶（简称限制酶）1972年，伯格首先在体外进行了DNA的改造，成功构建了第一个体外重组DNA分子。1982年，第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。1953年沃森和克里克建立DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。1967年，科学家发现，在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞间转移。20世纪70年代初，多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。1973年，科学家证明了质粒可以作为基因工程的载体，并实现了物种间的基因交流。至此，基因工程正式问世。1985年，穆里斯等人发明PCR,为获取目的基因提供了有效手段。

一、基因工程的概述基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。操作对象：操作水平：原理：结果：意义：基因（DNA）DNA分子水平基因重组创造出人类需要的新的生物类型和生物产品定向改造生物遗传特性水母的绿色荧光蛋白基因本质：基因在空间上转移并成功表达

一、基因工程的概述资料：抗虫棉的培育我国是棉花的生产和消费大国。棉花在种植过程中，常常会受到一些害虫的侵袭，其中以棉铃虫最为常见。棉铃虫可以使棉花产量减少三分之一，严重时，甚至能使一片棉田绝收。思考：如何培育出自身就能抵抗虫害的棉花呢?提取苏云金芽孢杆菌抗虫基因（Bt基因）与运载体DNA拼接导入普通棉花(无抗虫特性)棉花细胞(含抗虫基因)植物组织培养棉花植株(有抗虫特性)Bt蛋白

一、基因工程的概述思考：1.为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？①DNA分子的基本组成单位相同（4种脱氧核苷酸）②空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。③都遵循碱基互补配对原则脱氧核糖含氮碱基磷酸DNA立体结构DNA平面结构2.为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？①基因是控制生物性状的独立遗传单位。②遗传信息的传递都遵循中心法则。③生物界共用一套遗传密码。

一、基因工程的概述思考：DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。“分子手术刀”准确切割DNA分子“分子缝合针”“分子运输车”将DNA片段连接起来将体外重组好的DNA分子导入受体细胞

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1.定义：2.来源：（限制酶不是一种酶，而是一类酶）3.种类：数千种切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶。主要是原核生物，可人工合成识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。4.作用：限制酶注意：限制酶具有专一性，只能识别并切开双链DNA分子。

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”5.限制酶的识别序列大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。特点1：都可以找到一条中心轴线；特点2：中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称、重复排列的，称为回文序列。能被限制酶所识别的序列一般都有回文序列

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”（1）实例1——EcoRⅠ限制酶切割*EcoRⅠ识别序列为GAATTC*EcoRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键黏性末端黏性末端（2）实例2——SmaⅠ限制酶切割*SmaⅠ识别序列为CCCGGG*SmaⅠ切割部位为CG之间的磷酸二酯键平末端6.切割结果:DNA两条单链的切口处，伸出几个核苷酸，刚好能互补配对，这样的切口叫黏性末端。切口处是平整的，这样的切口叫平末端。

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”活动一：1.按照每种限制酶的识别序列裁剪纸张使其形成黏性末端思考：1.限制酶切一次可断开个磷酸二酯键，产生个黏性末端。22

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”活动一：2.写出各限制酶切割形成的黏性末端BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________-CTAG-TTAA-TCGA-CTAG思考：2.同