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第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养
皮肤的自体移植灰绿色小面积烧伤:患者通过切除+植皮(自身)后恢复1)使用他人皮肤如何?患者自身的不够用,如何解决?大面积烧伤?2)培养自身细胞?从社会中来动物细胞工程(动物细胞培养)可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增;目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤。
动物细胞工程动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞工程的基础人造皮肤克隆猴:中中和华华单克隆抗体动物细胞工程
动物细胞培养的条件一1.动物细胞培养的概念原理:操作原因:对象:原因:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。细胞增殖(有丝分裂)细胞分化程度低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。一般取材于动物胚胎或幼龄动物组织。①保证细胞需要的营养供应,②保证细胞内有害代谢物及时排出。
动物细胞培养的条件一思考·讨论:动物细胞培养实际上是在体外模拟体内的生理条件进行的培养。请根据内环境与外界环境进行物质交换的示意图,分析在体外培养动物细胞需要满足哪些条件?
血浆淋巴组织液营养激素,生长因子等神经系统内分泌系统免疫系统抗体特殊物质O2,CO2无毒无菌pH渗透压温度01动物细胞培养的条件
动物细胞培养的条件一2.动物细胞培养的条件动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。因为对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚。培养基的构成:一般使用液体培养基,也称为培养液。+合成培养基血清
动物细胞培养的条件一2.动物细胞培养的条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境①培养液和培养用具:灭菌处理;②无菌操作;③添加适量抗生素适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以为宜;②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为;③适宜的渗透压:维持细胞正常的和功能。定期更换培养液:以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。36.5±0.5℃7.2~7.4形态动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件
糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的气体环境2.动物细胞培养的条件适宜的温度、pH和渗透压维持培养液的pH95%空气+5%CO2的CO2培养箱O2:细胞代谢所必需的(有氧呼吸)松盖培养瓶CO2培养箱动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件动物细胞培养的条件一注意:我是空气不是氧气!
动物细胞培养的条件一1.动物细胞培养的概念原理:操作原因:对象:原因:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。细胞增殖(有丝分裂)细胞分化程度低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。一般取材于动物胚胎或幼龄动物组织。①保证细胞需要的营养供应,②保证细胞内有害代谢物及时排出。依据动物细胞培养概念,初步构建动物细胞培养的流程。动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散成适宜条件
动物细胞培养的过程二阅读P44-45“动物细胞培养过程”并思考:1、动物细胞培养过程为何将组织分散成单个细胞?用什么方法?2、用胰蛋白酶对动物组织进行处理说明细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?3、体外培养动物细胞有哪些类型?4、什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?5、如何区分原代培养和传代培养?6、为什么要进行分瓶培养?7、进行分瓶培养时,如何处理?8、多次用到胰蛋白酶的目的是什么?①悬浮生长②贴壁生长主要是蛋白质(胶原蛋白等);胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4与细胞培养液PH值相近,胃蛋白酶适宜PH为1.5,胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养中无活性。①细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖;②分散有利于与培养液充分接触,保证O2与营养供应和代谢物及时排出。用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理①贴壁生长:大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上.②接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。
■细胞贴壁:■培养瓶或培养皿壁要求:内表面光滑、无毒、易于贴附大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。动物细胞生长特
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