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- 2025-06-23 发布于湖南
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微生物的培养技术及应用
第二课时
;1.能解释选择培养的原理。
2.能概述测定微生物数量的常用方法。
3.能尝试完成微生物选择培养及计数实验的操作。;聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的技术,此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年,科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌,进而提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于聚合酶链式反应(PCR)。;1.概念:
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。;3.选择培养基配方的设计;1.如表所示为某微生物培养基的配方。下列说法中不正确的是()
A.此培养基属于固体培养基,其中的碳源是(CH2O)
B.配制培养基时,溶化后分装前必须要进行的是灭菌
C.接种时应在酒精灯火焰附近操作
D.若用该培养基选择培养纤维素分解菌,应除去青霉素,加入纤维素粉;如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌,还需要对土样进行适当的处理以及科学的测定微生物数量的方法——稀释涂布平板法。;1ⅹ107;待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d,在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。;2025/4/17;1.间接计数法——稀释涂布平板法;2025/4/17;某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每g样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)()
A.2.34×108
B.2.34×109
C.234
D.23.4;2.直接计数法——显微镜直接计数;1.实验目的
(1)从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。
(2)统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。
2.实验原理
绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分离尿素的细菌。
;2025/4/17;2025/4/17;每个浓度至少设置4个平板。1、2、3平板是选择培养基(实验组,三个重复),4为牛肉膏蛋白胨培养基(用以判断选择培养基是否具有选择作用)。
整个实验还要设置2个平板:不涂布稀释液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基,以验证培养基中是否含有杂菌。;(3)微生物的培养与观察
①培养条件:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30~37℃的温度下培养1~2d。
②观察:每隔24h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果。防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
③一般来说,在相同的培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征,如形状、大小和颜色等。;(4)结果分析
;2025/4/17;
A.在配制步骤②、③的培养基时,应先调pH值后高压蒸汽灭菌
B.步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落
C.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力;
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