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- 2025-06-23 发布于湖南
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第一章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用人教版·选择性必修3什么是培养基?如何配制?1什么是无菌技术?2怎样进行酵母菌的纯培养?3
课前导入向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶,由于制作工艺并不复杂,一些人会在家里自制酸奶,自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件,避免杂菌进入这需要应用无菌技术和微生物的培养技术
1.概念:个体无法用肉眼观察的微小生物。病毒草履草大肠杆菌常见微生物:酵母菌无细胞结构原核细胞真核细胞难以用肉眼观察的微小生物,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。
一、微生物的基本培养技术微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。1._____________________________________是研究和应用微生物的前提,也是发酵工程的重要基础。防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物2.在实验室培养微生物的基本要求:(1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件(2)确保其它微生物无法混入(3)并将需要的微生物分离出来培养基无菌技术纯化培养
一、培养基的配制1.培养基概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。2.作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。无有凝固剂琼脂液体培养基3.种类:固体培养基半固体培养基扩大培养、工业生产微生物的分离与鉴定,活菌计数,保藏菌种观察微生物的运动、分类鉴定
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。放线菌念珠菌霉菌酵母菌4.菌落不同菌落的形状、大小、颜色等不同,菌落是鉴定菌种的重要依据。
7015、培养基的基本成分:碳源、氮源、无机盐、水碳源无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-有机碳源:葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等不加含碳有机物的培养基:培养自养型微生物氮源无机氮源:NH4+、NO3-、NH3等。有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等无机盐功能:调节PH、维持渗透压水功能:良好的溶剂,参与细胞内的多项反应一、微生物的基本培养技术---配置培养基有机碳源:提供碳源、提供能源。不加氮源的培养基:培养固氮微生物有机氮源:提供氮源、提供能源。NH3(可提供能量)同一种物质能否既做作碳源又做氮源。
表1-11000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成注:牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和蛋白质等营养物质。基本成分:碳源、氮源、水、无机盐还需满足微生物对pH、特殊营养物质、O2的需求。乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊营养物质:维生素、氨基酸、生长因子等培养基中添加维生素培养基pH调至酸性提供无氧的条件培养基pH调至中性或弱碱性组分含量提供的主要营养物质牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水5.培养基的基本成分一、培养基的配制
微生物接种操作时为什么要“全副武装”和在专门的设备内进行?获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
二、无菌技术无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么作用?无菌技术还能有效避免操作者被微生物感染。无菌技术:获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌污染展开。两个方面:消毒对操作的空间、操作者的衣着和手灭菌培养细菌用的培养基与培养皿玻棒、试管、烧瓶、吸管和接种环等
二、无菌技术使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。煮沸消毒法巴氏消毒法化学药物消毒法紫外线消毒1.消毒:100℃煮沸5~6min。可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。62~65℃煮30min或80~90℃下处理0.5~1min。用70%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。对接种室、接种箱或超净工作台用紫外线照射30min,以杀死物体表面或空气中的微生物。应用场景:对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
二、无菌技术项目主要方法应用范围消毒巴氏消毒法℃消毒30min或℃处理15s或℃处理10~15s、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体煮沸消毒法100℃煮沸min家庭餐具等生活用品紫外线消毒30W紫外灯照射min(损伤细菌的DNA)化学药物消毒擦拭实验者双手水源牛奶63~6
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