T_ZNZ 320-2025 植物源性食用农产品中总花色苷含量的测定 分光光度法.docxVIP

ICS65.020.01CCSB05

TZNZ

浙江省农产品质量安全学会团体标准

T/ZNZ320—2025

植物源性食用农产品中总花色苷含量的测

定分光光度法

Determinationoftotalanthocyanincontentinedibleagricultural

productsofplantorigin—Spectrophotometricmethod

2025-02-18发布2025-03-18实施

浙江省农产品质量安全学会发布

I

T/ZNZ320—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由浙江省农产品质量安全学会提出并归口。

本文件起草单位：中国水稻研究所、农业农村部稻米及制品质量检验测试中心。

本文件主要起草人：邵雅芳、朱大伟、牟仁祥、徐清宇、章林平、陈铭学。

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T/ZNZ320—2025

植物源性食用农产品中总花色苷含量的测定分光光度法

1范围

本文件规定了植物源性农产品中总花色苷含量的分光光度检测方法。

本文件适用于谷物、薯类、果蔬等植物源性食用农产品中总花色苷含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

花色苷anthocyanin

花青素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，能使植物呈现由红、紫红到蓝等不同颜色。

4原理

花色苷发色团的结构转换与pH值相关。pH为1.0时，花色苷以红色的2-苯基苯并吡喃的形式存在；pH为4.5时，花色苷以无色甲醇假碱形式存在。花色苷在520nm波长处有吸收峰，在700nm波长处有干扰峰。分别测定待测样品在pH值为1.0和4.5缓冲液中520nm和700nm波长下的吸光值，根据吸光度示差值（A）计算待测样品中总花色苷的含量(ω)。

5试剂和材料

除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1浓盐酸(HCl)：质量分数为36%-38%。

5.1.2甲醇(CH3OH)。

5.1.3氯化钾（KCl）。

5.1.4醋酸钠（CH3COONa）。

5.2试剂配制

5.2.1盐酸溶液[c(HCl)=1mol/L]：吸取16.66mL浓盐酸（5.1.1），缓慢加入约有100mL水的烧杯中，搅拌均匀。待冷却至常温后，转移至200mL容量瓶中定容。

5.2.2提取液：甲醇（5.1.2）和盐酸溶液（5.2.1）按照体积85+15混合，即取850mL甲醇和150mL盐酸溶液混匀。

5.2.3氯化钾溶液（pH=1.0）：称取14.9g氯化钾（5.1.3）于烧杯中，加入1L水溶解，并用盐酸溶液（5.2.1）调整pH值至1.0，现用现配。

5.2.4醋酸钠溶液（pH=4.5）：称取16.4g醋酸钠（5.1.4）于烧杯中，加入1L水溶解，并用盐酸溶液（5.2.1）调整pH值至4.5，现用现配。

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6仪器

6.1分光光度计：波长范围（380nm~880nm）。

6.2分析天平：感量为0.001g。

6.3磨粉机和匀浆机。

6.4离心机：转速≥6000r/min。

6.5摇床。

7分析步骤

7.1试样制备

采用四分法分取样品。水分含量低的样品，如黑米、黑豆等谷物类和豆类，用磨粉机进行粉碎，过孔径为250μm的筛子；水分含量高的样品，如杨梅、蓝莓、葡萄、茄子等水果类和蔬菜类，将样品切碎混匀、四分法后取约200g于匀浆机中匀浆。所有样品在-18°C条件下保存备用。

7.2总花色苷提取

水分含量低的样品，称取粉碎后的平行试样0.5g（精确至0.001g）；水分含量高的样品，称取匀浆后的平行试样5.0g（精确至0.001g）。将称好的样品置于50mL离心管中，向其加入10mL提取液(5.2.2)，混匀后摇床振荡20min，然后6000r/min离心10min，并将