遗传测序仪介绍(分析“仪器”文档)共69张课件.pptxVIP

遗传测序仪介绍(分析“仪器”文档)共69张课件.pptx

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遗传测序仪介绍;AB遗传分析仪发展历史;1986年370型全世界第一台基因分析仪

1991年373型基因分析仪

1995年377型基因分析仪,光栅+CCD

1996年310型毛细管基因分析仪,全世界第一台毛细管分析仪

1997年377-96基因分析仪

1998年3700型96道毛细管基因分析仪

2000年310016道毛细管基因分析仪

2002年3100Avant4道毛细管基因分析仪

2002年373048道毛细管基因分析仪

3730xl96道毛细管基因分析仪

2004年31304道毛细管基因分析仪

3130xl16道毛细管基因分析仪

2007年10月新一代超高通量序列分析仪SOLID

2009年3500系列毛细管基因分析仪

2010年第三代测序仪IonTorrent

;主要内容;

测序仪工作原理;;;仪器工作原理

-荧光标记的DNA片段在检测窗口被检测;仪器工作原理

-激发出的荧光由于波长不同而被分离,并被CCD相机收集;160injectionswarranty

Duplicate,编辑复制版theneditthecopy

TRIVIA:什么是CCD?

软件将光学信号转化为电信号

3730

阴极bufferCBC

TRIVIA:什么是CCD?

样品检测流程——实时监测

存储在冰箱冷藏,使用前恢复室温

7daylimit

ChargedCoupledDevice电荷耦合器件

7daylimit

PerformQCChecks;毛细管空间定位(SpatialCalibration);什么时候要做空间定位?;;;Clickfor

anyfailedcalibration;;问题;

让机器认识纯荧光。

每个染料都有自己的最大发射波长,但是不同染料之间有相互重叠的部分,重叠的部分通过光谱校正来识别。;光谱重叠;;

什么时候做?

使用新的染料组合

调整过仪器的光路系统

不同颜色的荧光间出现干扰(有拔起或下压峰)

参数改变(如毛细管长度改变)

作为每年一次的日常维护

怎么做?

按照试剂盒说明书配制Matrix,对于8道或者24道的仪器,分别加第一个run的孔,每个孔加10μl配置好的混合物.

在DataCollection窗口中操作;概要;电源

开关;宽度:61cm

深度:61cm

高度:72cm

重量:82kg;通量增加;;;胶袋;CBC–阴极缓冲液槽;易于安装的毛细管结构;仪器耗材——毛细管;仪器耗材——胶;保存在冰箱冷藏室的中央

使用前,放置在室温下1hour

在仪器上可放置1周

??同仪器之间的胶袋不要交换使用,

胶袋中的胶包括安装和安装后维护使用的部分,如排气泡.

过量的维护操作会影响到跑样品使用的数量

;;仪器耗材——缓冲液;Oninstrument:;预装好的1xrunningbuffer

1个包装4个

易于安装

放置在仪器上的有效使用期限为7天

安装前确保溢杯中的缓冲液都流到主腔中

确保主腔中的缓冲液达到Fillline

存储在冰箱冷藏,使用前使之恢复室温;用途

填充胶泵

换胶时冲洗胶泵使用

仪器长期关机时使用

可供一次使用,足量

;耗材在仪器上的放置有效期;仪器开机;快捷操作键;样品检测流程;样品检测流程——实验前准备;;PlateProperties界面中给板命名;PlateContents界面中完成板内信息;;;;;样品检测流程——查看电泳结果;仪器校准——在哪里找;空间定位;预置了HID相关文件:

120injections(8cap)

进入DataCollection软件,

可以基于出厂设置、模板和锁定的文件,点击

Standardvolume

3730xl96道毛细管基因分析仪

Oninstrument:

在下一行的命令窗口中输入exit,回车,关闭Daemon(DC2.

只有带电分子能够进入毛细管.

7daylimit

Autosampler

样品检测流程——实时监测

-384samplesize;

步骤:

配制光谱校正标准品:置于加样板第一个Run(非常重要!)

上机检测标准品:填写几个电泳参数

对结果接受or拒绝;;;仪器校准——光谱校准结果;;参数设置——Library是什么?;包括以下管理设置:

Plates

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