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PCR检验技术培训测验试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.PCR技术中，引物的作用是（）

A.提供模板

B.打开DNA双链

C.催化DNA合成

D.使DNA聚合酶能够从其3端开始合成新的DNA链

答案：D

解析：引物是一小段单链DNA或RNA，它能与模板DNA特定区域互补配对，为DNA聚合酶提供起始点，使DNA聚合酶能够从其3端开始合成新的DNA链。模板是DNA本身，打开DNA双链是通过高温变性实现，催化DNA合成的是DNA聚合酶，所以A、B、C选项错误。

2.以下哪种物质不是PCR反应体系的必需成分（）

A.模板DNA

B.dNTP

C.RNA聚合酶

D.引物

答案：C

解析：PCR反应体系的必需成分包括模板DNA提供复制的模板，dNTP是合成DNA的原料，引物引导DNA合成。而PCR中使用的是DNA聚合酶，不是RNA聚合酶，所以答案选C。

3.PCR反应的变性温度一般为（）

A.55℃左右

B.72℃左右

C.94℃左右

D.37℃左右

答案：C

解析：在PCR反应中，变性步骤是将双链DNA解开成单链，需要较高的温度，一般为94℃左右，所以选C。55℃左右通常是退火温度，72℃左右是延伸温度，37℃不是PCR反应的特征温度。

4.PCR反应的延伸时间主要取决于（）

A.引物的长度

B.模板的长度

C.DNA聚合酶的活性

D.dNTP的浓度

答案：B

解析：延伸时间主要与扩增片段（即模板）的长度有关，一般DNA聚合酶每分钟大约可以合成1000-2000个碱基对，所以根据模板长度来确定延伸时间。引物长度主要影响退火温度等，DNA聚合酶活性影响反应速度但不是决定延伸时间的主要因素，dNTP浓度主要影响反应的效率等，所以答案是B。

5.TaqDNA聚合酶的特点是（）

A.具有3→5外切酶活性

B.不耐热

C.具有逆转录活性

D.具有5→3聚合酶活性

答案：D

解析：TaqDNA聚合酶具有5→3聚合酶活性，能够以dNTP为原料，从引物的3端开始合成DNA链。它没有3→5外切酶活性，所以没有校对功能；它是耐热的DNA聚合酶，可在高温下保持活性；它不具有逆转录活性，逆转录是逆转录酶的功能，所以答案选D。

6.在PCR反应中，循环次数一般设置为（）

A.5-10次

B.10-15次

C.25-35次

D.40-50次

答案：C

解析：循环次数太少，扩增产物量不足；循环次数太多，容易产生非特异性扩增。一般PCR反应的循环次数设置为25-35次，所以选C。

7.以下关于荧光定量PCR技术的描述，错误的是（）

A.可以对核酸进行定量分析

B.分为探针法和染料法

C.不需要引物

D.实时监测PCR过程

答案：C

解析：荧光定量PCR技术可以对核酸进行定量分析，根据使用的荧光标记物不同分为探针法和染料法，它能够实时监测PCR过程。而PCR反应都需要引物来引导DNA合成，所以C选项错误。

8.PCR产物的检测方法不包括（）

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.质谱分析

D.免疫荧光法

答案：D

解析：PCR产物的检测方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，可根据条带的大小和亮度来初步判断产物的情况；质谱分析可以对PCR产物进行精确的分子量测定等。免疫荧光法主要用于检测抗原-抗体反应，一般不用于PCR产物的检测，所以答案是D。

9.在PCR反应中，退火温度过高会导致（）

A.引物与模板结合不充分

B.非特异性扩增增加

C.DNA聚合酶活性降低

D.模板DNA降解

答案：A

解析：退火温度过高，引物与模板之间的氢键难以形成，会导致引物与模板结合不充分。非特异性扩增增加一般是退火温度过低导致的；DNA聚合酶活性主要受温度范围和酶本身特性影响，退火温度过高一般不会直接导致其活性降低；模板DNA降解通常与高温长时间处理等因素有关，不是退火温度过高的主要后果，所以选A。

10.以下哪种情况可能导致PCR反应无扩增产物（）

A.引物浓度过高

B.模板DNA量过多

C.缓冲液pH不合适

D.dNTP浓度过高

答案：C

解析：缓冲液pH不合适会影响DNA聚合酶的活性，从而可能导致PCR反应无扩增产物。引物浓度过高可能会增加非特异性扩增；模板DNA量过多一般不会导致无扩增产物，只是可能会