环境工程微生物学微生物的生长与繁殖.pptVIP

Afterincubation,countcoloniesonplatesthathave25-250colonies(CFUs)第63页，共113页，星期日，2025年，2月5日PourplatePourplate第64页，共113页，星期日，2025年，2月5日重量法此法的原理是根据每个细胞有一定的重量而设计的。它可以用于单细胞、多细胞以及丝状体微生物生长的测定。微生物湿重微生物干重浊度法蛋白质总量DNA含量第65页，共113页，星期日，2025年，2月5日Turbidity第66页，共113页，星期日，2025年，2月5日蛋白质总量蛋白质总量＝含氮量×6.25细胞总量＝蛋白质总量÷(50%～80%(或65%))≈蛋白质总量×1.54DNA含量核酸DNA是微生物的重要遗传物质，每个细菌的DNA含量相当恒定，平均为8.4×10-5ng.第67页，共113页，星期日，2025年，2月5日生理指标法生理指标包括微生物的呼吸强度、耗氧量、酶活性、生物热等。根据微生物在生长过程中伴随出现的这些指标，样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显，因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。第68页，共113页，星期日，2025年，2月5日微生物生长的环境因子(自学)一、温度 1、微生物生长的温度范围温度是微生物生长的重要环境因子之一。微生物生长的温度范围很广，在-5~85℃范围内均有微生物生长，少数嗜热微生物的生长温度可达100℃以上。第69页，共113页，星期日，2025年，2月5日根据不同微生物生长的温度可将其分为三大类:低温型（psychrophiles）中温型（mesophiles）高温型（thermophiles）绝大多数微生物的生长温度属中温型。第70页，共113页，星期日，2025年，2月5日微生物对温度的适应范围微生物类型生长温度（℃）主要分布处所最低最适最高低温型专性嗜冷-125-1515-20两极地区兼性嗜冷-5~010~2025-30海水及食品冷藏箱中温型10-2025~4040~50哺乳动物生活的环境高温型嗜热3045~6070堆肥和沼气发酵池等极端嗜热3070~90100以上温泉和洋底火山口第71页，共113页，星期日，2025年，2月5日第72页，共113页，星期日，2025年，2月5日微生物在其最低生长温度下酶的活性降低，微生物代谢活动减弱，处于休眠状态，但仍然维持生命。故常在4℃~-85℃左右冰箱中保存菌种。第73页，共113页，星期日，2025年，2月5日高温可以杀死微生物，这是因为高温使菌体内含有的蛋白质凝固，酶变性失活，代谢停滞而死亡的缘故。能在10min内杀死某种微生物的最高温界限称为致死温度（lethaltemperature）。不同微生物的致死温度有差异，大多数细菌、病毒、酵母菌和丝状真菌营养体的致死温度为50~65℃。第74页，共113页，星期日，2025年，2月5日微生物菌体内含水分愈高，所需致死温度愈低。芽孢含水量少，在100℃沸水中需煮几十分钟甚至1~2h才死去，而无芽孢菌体70℃十几分钟即死。干热灭菌时，微生物的营养体在100℃时需1~2h、芽孢在加热至160℃后需1~2h才能灭活。实际应用中，常常采用高温的方式杀死基质或器皿上的微生物。第75页，共113页，星期日，2025年，2月5日第76页，共113页，星期日，2025年，2月5日2.高温灭菌：巴斯德消毒法:杀死大多数腐败菌或者病原微生物，如牛奶消毒63煮30min72℃煮15sec耐热的微生物仍然存活第77页，共113页，星期日，2025年，2月5日2、高温灭菌：湿热灭菌 第78页，共113页，星期日，2025年，2月5日2.高温灭菌:干热灭菌干热灭菌火焰灼烧：酒精灯灼烧灭菌焚烧：垃圾处理厂的焚烧垃圾干热灭菌：恒温干燥箱干热灭菌高压蒸汽灭菌灭菌方式170?C,2hr121?C,15min第79页，共113页，星期日，2025年，2月5日3.低温保藏菌种和食品低温抑制微生物生长冰箱保存（4℃）超低温（-20~-85℃）冻干法(Lyophilization)第80页，共113页，星期日，2025年，2月5日沙土管保存主要适用于产孢子的微生物，如芽孢杆菌、放线菌等。

将菌种接种培养，长出大量的孢子，洗下孢子制备孢子悬液，加入无菌的沙土试管中，减压干燥，抽干水分，最后用石蜡、胶塞等封闭