药品检验检测机构 凝胶检测技术鲎试剂质量标准（征求意见稿）.pdf

T/CNPHARS000X—202X

药品检验检测机构凝胶检测技术鲎试剂质量标准

1范围

本标准旨在规定凝胶检测技术鲎试剂的质量标准。包括鲎试剂的性状、鉴别、检查、批内精

密度、灵敏度、灵敏度规格、贮藏等。本标准适用于药品检验检测机构以及涉及注射剂原辅料、

包材及制剂的生产企业等机构开展细菌内毒素检验检测和科研工作。

2规范性引用文件

中华人民共和国药典。

3术语和定义

凝胶检测技术鲎试剂：本品为鲎科动物中国鲎（Tachypleustridentatus）或美洲鲎（Limulus

polyphemus）的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。本品含C因子（FactorC）、B因子（Factor

B）、G因子（FactorG）、凝固酶原（Proclottingenzyme）及凝固蛋白原（Coagulogen）

等,其中C因子、B因子及G因子均为丝氨酸蛋白酶。在细菌内毒素作用下，C因子、B因子被逐

级激活，最后激活凝固蛋白原使其生成交联状的凝固蛋白形成凝胶。其灵敏度（λ）以细菌内

毒素国家标准品测定，应为标示值的50%~200%。

凝胶检测技术：系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理进行限度检测或定量检测内毒素的

方法。

鲎试剂灵敏度：在本检查法规定的条件下，使鲎试剂产生凝集的内毒素的最低浓度即为鲎试剂

的标示灵敏度，用EU/ml表示。

细菌内毒素标准品：细菌内毒素标准品分为国家标准品和工作标准品。其中国家标准品系自大

肠埃希菌提取精制，并以细菌内毒素国际标准品标定其效价，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度、

标定细菌内毒素工作标准品的效价，干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂

灵敏度复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验。细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家

标准品为基准标定其效价，用于干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏

度复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验（编号B和C的定义见《中国药典》四部附录1143

细菌内毒素检查法）。

阳性和阴性：将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变

形、不从管壁滑脱者为阳性；未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性。

4质量标准

4.1性状

本品为白色或类白色冻干块状物或粉末，在水中易溶。

4.2鉴别

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取本品按标示装量加入细菌内毒素检查用水溶解后，吸取0.1ml或0.05ml，加入0.1ml或0.05ml浓度不

低于10λ的细菌内毒素标准品，混匀后，于37℃±1℃中放置60分钟±2分钟，应有凝胶形成。

4.3检查

4.3.1水分

0.3ml和以上装量规格的鲎试剂，照水分测定法（《中国药典》2025年版四部通则0832第一法2

库仑滴定法）检测，含水分应不超过5%。0.3ml以下装量鲎试剂可采用定期核查鲎试剂灵敏度的形式，

考察水分对鲎试剂活性的影响。

4.3.2自身凝集

取本品4支，按标示量加入相应体积的配带鲎试剂溶剂或细菌内毒素检查用水，溶解后，分别从

每支按实验体积取0.1ml或0.05ml装于试管或使用复溶后0.1ml/支规格的原安瓿，再分别加入配带的鲎

试剂溶剂或细菌内毒素检查用水0.1ml或0.05ml，混匀后，于37℃±1℃水浴中放置4小时，结果应均为

阴性，若有2管及以上为阳性，判为不合格；若仅有1管为阴性，照同样方法，另取8管重复检查，8

管应均为阴性方为合格。

4.3.3缓冲能力

任意取5％葡萄糖注射液、氯化钠注射液或灭菌注射用水，加稀盐酸调节pH值为2.90~3.00，取此

溶液适量与等量鲎试剂溶液混匀，pH值应为6.00~8.00。

4.4批内精密度

取10支鲎试剂，按标示量加入相应体积的配带鲎试剂溶剂或细菌内毒素检查用水（如为0.1ml/支

装量的鲎试剂，则每支加入0.2ml溶解），每支取0.1ml加入到酶标板或反应小试管中，再加入0.1ml浓

度为λ的标准内毒素溶液（如为0.1ml/支装量的鲎试剂，则每支