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猕猴桃根部泛菌葡萄糖异构酶的异源表达系统构建与功能验证
目录
文档概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景及意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1.1猕猴桃产业现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.1.2葡萄糖异构酶的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.1.3异源表达系统在生物工程中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
1.2文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
1.2.1国内外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
1.2.2异源表达系统的研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.2.3猕猴桃根部泛菌的研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
1.3研究内容与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
1.3.1研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
1.3.2研究方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
1.3.3预期成果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
2.1.1主要试剂和仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
2.1.2实验所用植物材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
2.1.3实验动物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
2.2.1基因克隆与构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
2.2.2异源表达载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
2.2.3转基因植物的培育与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
2.2.4葡萄糖异构酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
2.3数据处理与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
2.3.1数据收集方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
2.3.2数据分析技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
2.3.3结果解释与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
猕猴桃根部泛菌葡萄糖异构酶的异源表达系统构建．．．．．．．．．．．40
3.1基因克隆与表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
3.1.1目的基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
3.1.2表达载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
3.1.3重组质粒的鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
3.2转基因植物的培育与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
3.2.1农杆菌介导的转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
3.2.2转基因植株的筛选与培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
3.2.3转基因植株的分子鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
3.3表达产物的分析与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
3.3.1表达产物的提取．．．．．
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