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动物细胞培养和核移植技术
010204那么动物细胞常用的技术手段呢?植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞工程常用的技术手段有哪些?问题探讨
动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等动物细胞培养动物细胞工程技术的基础动物细胞工程的技术手段
原理:动物细胞培养细胞增殖从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
动物细胞培养的过程(见课本)
过程:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官(取材)细胞悬液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液(分解细胞间的蛋白)原代培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质遗传物质未改变遗传物质已改变
遗传物质培养代数细胞株和细胞系的区别:代培养:传代培养:原代培养与传代培养的区别分装之前,10代以前分装后继续培养,10代以后
动物细胞培养的条件无菌、无毒的环境添加一定量的抗生素定期更换培养液培养液和培养器具无菌处理
无菌、无毒的环境营养补充合成培养基中缺乏的物质葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境营养温度和PH5+0.5度PH为动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境温度和PH营养气体环境:O2和CO2(95%空气和5%CO2)动物细胞培养的条件
为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?独特之处有:1、液体培养基2、成分中有动物血清等这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强1、较植物组培培养基有何独特之处?
防止细胞间接触抑制现象,使细胞与培养液更充分接触为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?
01不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,而不能发育成个体02胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?03能4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?
01注意时间的控制能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近02036、动物细胞培养过程中特别要注意什么?
植物组织培养动物细胞培养植物细胞的全能性细胞株、细胞系植物体或组织获得细胞或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素液体培养基固体培养基细胞增殖培养结果培养目的培养基特有成分培养基性质原理
生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植用于检测有毒物质用于生理、病理、药理等方面的研究动物细胞培养的应用
利用动物细胞核移植技术如何使动物细胞的全能性表达出来?
将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植(难度高)用核移植的方法得到的动物。克隆动物:记一记动物核移植:
黑面绵羊去核卵母细胞01白面绵羊乳腺细胞核02重组细胞03动物细胞培养(或早期胚胎培养)04早期胚胎05胚胎移植06另一头绵羊的子宫07妊娠、出生08克隆羊多利09细胞核移植10动物体细胞核移植技术
卵母细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞原因?结论?4、多利的大部分性状与谁一样?动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植白面绵羊高度分化的体细胞核具有全能性3、克隆过程运用的技术手段?细胞比较大,易操作细胞质中含有使体细胞核全能性表达出来的物质
体细胞核移植技术存在的问题克隆动物的研究意义1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白2.改良动物品种3.作为异种移植的供体4.保护濒危动物1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大,异常肥胖,发育困难,免疫失调等。2.成功率非常低3、克隆动物食品的安全性问题。
教学反馈ADAA.细胞系B.细胞株C.原代细胞D.传代细胞1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞()A.动物细胞融合B.单克隆抗体C.胚胎移植D.动物细胞培养2、动物细胞工程技术的基础是A.培养基不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株。3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于
4、一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件()①无毒的环境②无菌的环境③培养基需要加入血清④温度与动物体温相似⑤需要O2,不需要CO2⑥CO2能调节培养液PHA、①②③④⑤⑥B、①②③④C、①③④⑤⑥D、①②③④⑥D
A动物细胞培养的特点
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