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下面我们一起去无菌操作间进行实验……01020304什么是细胞的全能性?植物细胞为什么具有全能性?植物体内的细胞为什么没有表现出全能性?高度分化的植物细胞再发育成完整植株的关键变化是什么?【知识储备情况检测】已分化完整个体全套遗传物质受精卵生殖细胞体细胞植物细胞动物细胞*********学生回答后,在植物组织培养的过程中,往往使用的是无菌苗,而我们学校有非常便利的资源——生物实践基地,我们可以从温室取材,培养成的幼苗可以移栽到温室中生长,可以节省学校买苗的开支。上节课我们已经配置了培养基并灭菌,这节课,我们要进行外植体的消毒和无菌接种2分钟**考虑到黄瓜容易成活,我们选取黄瓜苗作为材料,并已经提前冲洗,接下来你们要完成的是第二步和第三步,下面让周老师给大家讲解并视频演示消毒过程10分钟,接下来我们去无菌操作室进行外植体消毒,两人一组(带学生进无菌操作室)15分钟***********01大花蕙兰是兰科多年生草本植物,花色艳美,花期较长,且多在春节期间开放,具有极高的观赏价值。大花蕙兰多为杂交品种,种子繁殖无法保持其品种特性,且结实率较低。如何在短时期内大量繁殖大花蕙兰并保持其优良特性呢?植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。01020304什么是细胞的全能性?植物细胞为什么具有全能性?植物体内的细胞为什么没有表现出全能性?高度分化的植物细胞再发育成完整植株的关键变化是什么?【知识回顾】细胞的全能性:某生物的细胞,依然具有发育成的潜能。已分化完整个体原因:生物体的每一个细胞都含有该物种特有的,从而具有发育成完整个体的潜能。全套遗传物质全能性大小比较:受精卵生殖细胞体细胞植物细胞动物细胞基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期,生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的,合成的蛋白质也不一样,从而形成了不同的组织和器官。01020304离体无菌营养激素控制光照05控制温度06生长素:细胞分裂素:主要促进生根诱导芽的分化生长素细胞分裂素高低适中作用效果有利于的分化抑制形成有利于的分化抑制形成促进生长芽芽根愈伤组织控制激素比例重要提示:叶绿素的形成离不开光光照控制论脱分化:避光再分化:需光植物体根、芽离体的植物器官组织或细胞愈伤组织脱分化再分化植物组织培养实验操作具体流程有哪些步骤呢?培养基的配置无菌接种及培养生物实践基地植物组织培养实验操作步骤外植体消毒移栽生物实践基地*培养基的制备①计算②称量③溶化④调pH⑤分装⑥灭菌(1)取材:取生长旺盛的嫩枝(外植体不能太小,否则会影响愈伤组织的形成)。(2)消毒与修剪外植体:①流水冲20分钟;(课前)②放入75﹪酒精中摇动2~3次,持续30秒,无菌水冲洗2~3次,用无菌吸水纸吸干;③在2﹪~10%的次氯酸钠溶液中消毒8~10分钟,无菌水冲洗2~3次,无菌吸水外植体消毒无菌接种培养接种培养需要的仪器设备超净工作台、光照培养架或恒温光照培养箱、解剖剪、镊子、酒精灯、火柴(打火机)、酒精棉球、无菌培养皿、废液缸。*1、双手消毒使用酒精棉球擦拭双手,尽量擦拭到手指缝和指甲盖位置,点燃酒精灯。(图1,2)注:如果用火柴点酒精灯一定要让火柴熄灭后方可放入废液缸,以免点燃使用过的酒精棉球引起火灾。(图1)(图2)*2、接种器械消毒将剪刀、解剖剪(解剖刀)和镊子放于酒精灯火焰进行灼烧,(图3,4)(图3)(图4)3、修剪外植体剪去外植体的叶子,只留下茎段和叶柄。把外植体按芽剪成“丫”字型,只留一个腋芽和叶柄。(图5,6,7)修剪叶片时先四周剪平,剪出伤口,叶子较大的话再剪开,最后剪成边长0.5cm大小即可。修剪茎段即剪取两个腋芽之间的部分。(图5、6、7)4、接种培养把未接种培养基瓶口在酒精灯火焰灭菌2~3秒后打开瓶盖,用镊子夹取腋
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