第三荧光分析法.pptVIP

荧光量子产率:它表示物质发荧光的能力许多吸光物质并不能发荧光，因为在激发态分子释放激发能的过程中除荧光发射外，还有许多上面提到的辐射和非辐射的跃迁过程与之竞争。荧光的量子产率与上述的每个过程的速率常数有关。表达式如下荧光发射过程的速率常数其他有关的过程速率常数总和凡是可以使升高，降低的因素都可以增强荧光主要决定于化学结构，主要决定于化学环境，也与化学结构有关。**第30页，共53页，星期日，2025年，2月5日跃迁类型实验表明，大多数荧光化合物都是由π→π＊或ｎ→π＊跃迁激发，然后经过振动弛豫或其他无辐射跃迁，再发生π＊→π或π＊→ｎ跃迁而产生荧光，其中π＊→π的跃迁的量子效率较高。此外，在π＊→π跃迁过程中，通过系间跨越跃迁至三重态的速率常数也较小，也有利于荧光的发射。共轭效应含有π→π＊跃迁能级的芳香族化合物的荧光最强。这种体系中的π电子共轭度越大，则π电子非定域性越大，越易被激发，荧光也就越易发生，而且荧光光谱将随共轭程度的增加向长波移动。**第31页，共53页，星期日，2025年，2月5日绝大多数能发生荧光的物质含有芳香环或杂环。任何有利于提高π电子共轭度的结构改变都将提高荧光效率，并使荧光波长向长波方向移动。刚性平面结构实验发现多数具有刚性平面结构的有机分子具有强烈的荧光。因为这种结构可以减少分子的振动，使分子与溶剂或其他溶质分子的相互作用减小，减少了碰撞去活的可能性。酚酞荧光素无荧光强荧光氧桥**第32页，共53页，星期日，2025年，2月5日取代基效应芳香族化合物苯环上的不同取代基对该化合的荧光强度和荧光光谱有很大的影响。给电子基团，如-0H、-OR、-NH2、-CN、-NR2等，使荧光增强。吸电子基团，如-COOH、-C=O、-NO2、-NO、卤素离子等，会减弱甚至猝灭荧光。如果将一个高原子序数的原子引入到π电子体系中，往往会增强磷光而减弱荧光。“重原子效应”——增加系间跨越速率所致。**第33页，共53页，星期日，2025年，2月5日如，卤代苯中双取代和多取代物对非定域π电子激发的影响较难预测。但若能增加分子的平面性，例如取代基之间能形成氢键，则荧光增强；反之，则荧光减弱。溴苯无荧光氟苯氯苯碘苯**第34页，共53页，星期日，2025年，2月5日四、溶液的荧(磷)光强度荧光强度与溶液浓度的关系荧光量子产率荧光强度If与溶液浓度c的关系：根据Beer定律，经推导可得：当I0和一定时：吸收的光量线性关系成立条件**第35页，共53页，星期日，2025年，2月5日影响荧光强度的因素溶剂：溶剂效应和特殊溶剂效应。溶剂效应：溶剂的折射率和介电常数的影响。普遍存在。溶剂对光的散射和折射。溶剂极性增大，对激发态的稳定作用增强，使荧光强度增加，光谱红移。特殊溶剂效应：荧光体和溶剂分子间的特殊化学作用。如氢键的生成和化合作用。对荧光光谱的强度和形状影响大。温度：敏感，影响大。下降：碰撞失活几率减小，有利于荧光产生。分析时要控制好温度。**第36页，共53页，星期日，2025年，2月5日溶液pH值：带有酸性或碱性官能团的大多数芳香族化合物的荧光一般都与溶液的pH有关。影响分子的存在形式。如，苯胺：pH7-12，分子形式，蓝色荧光pH2或pH13，离子形式，无荧光金属离子与有机试剂形成的发光螯合物也受到溶液pH的影响。影响螯合物的形成和组成。如，镓与2,2’-二羟基偶氮苯的螯合物：pH3-4，1:1螯合物，有荧光pH6-7，1:2螯合物，无荧光**第37页，共53页，星期日，2025年，2月5日内滤光作用和自吸收现象：内滤光作用：溶液中若存在着能吸收激发或荧光物质所发射光能的物质，就会使荧光减弱，这种现象称为内滤光作用。如，1μg·cm-3的色氨酸溶液中，如有K2Cr2O7存在，由于色氨酸的激发和发射峰附近正好是K2Cr2O7的两个吸收峰，K2Cr2O7吸收了色氨酸的激发能和发射的荧光，使测得的色氨酸荧光大大减弱。自吸收现象：内滤光作用的另一种情况是荧光物质的荧光发射光谱的短波长一端与该物质的吸收光谱的长波长一端有重叠，在溶液浓度较大时一部分荧光发射被自身吸收，这种现象称为自吸收。**第38页，共53页，星期日，2025年，2月5日第三荧光分析法*第1页，共53页，星期日，2025年，2月5日目录§3-1概述§3-2荧光分析基本原理§3-3荧光分析仪器