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基于POD效应的Au@Pd纳米酶在重疾的应用

摘要

目的

在全球范围内，癌症和心肌梗死等重大疾病的发病率和死亡率不断上升，给人

类健康带来巨大挑战。目前，临床上对这些重大疾病的诊断和治疗仍然依赖传统治

疗方式，然而这些方法受限于仪器设备和医生技术水平，且容易对正常细胞造成误

伤。因此，寻求新的诊断和治疗手段，以提高疾病治疗效果、降低治疗风险，已成

为当前医学领域亟待解决的重要问题。在癌症治疗方面，我们成功合成了具有过氧

化物酶性质的Au@Pd纳米酶，它能够催化HO生成更高生物毒性的活性氧(Reactive

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oxygenspecies,ROS），破坏细胞的氧化还原稳态，导致DNA和蛋白质损伤，诱导

细胞凋亡。此外，癌症常伴随细菌感染，Au@Pd纳米酶生成的ROS会破坏细菌细

胞膜，进而引起细菌DNA和蛋白泄漏，最终导致细菌死亡。在心肌梗死诊断方面，

我们将具有过氧化物酶性质的Au@Pd纳米酶取代传统免疫测流层试纸条的胶体金，

利用过氧化物酶催化TMB显色的原理，提高心梗检测试纸条的显色灵敏度。

方法本研究通过柠檬酸三钠还原法制备AuNPs，进一步通过抗坏血酸还原并沉积

钯的方法成功合成了含有Au和Pd两种贵金属的合金纳米酶（Au@PdNPs）。通过

透射电子显微镜(TransmissionElectronMicroscope,TEM)、扫描电子显微镜（Scanning

electronmicroscope,SEM）、能谱仪(energy-dispersivespectroscopy,EDS)、粒径检测

和zeta电位检测等实验对Au@PdNPs进行表征。通过检测溶血率和粒径稳定性证

明Au@PdNPs的生物相容性。通过TMB显色实验证明Au@PdNPs的过氧化物酶

活性。通过细胞摄取、ROS检测、流式细胞检测、活死细胞染色、DNA损伤、CCK-

8（CellCountingKit-8）、蛋白免疫印迹（WesternBlot,WB）、实时荧光定量PCR

（QuantitativeReal-timePCR,qPCR）、生理生化指标检测等实验证明Au@PdNPs的

体外抗肿瘤效果。通过尾静脉注射Au@PdNPs到4T1荷瘤小鼠体内验证Au@Pd

NPs的体内抗肿瘤效果。通过OD560的吸光度和固体培养基培养Au@PdNPs处理组

的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌验证Au@PdNPs的体外抗菌性能。通过将Au@PdNPs

涂抹在金黄色葡萄球菌的感染部位验证Au@PdNPs的体内抗菌治疗效果。通过

Au@PdNPs取代传统免疫测流层析检测试纸条的胶体金，并在T线上喷涂含TMB

和H2O2的胶水检测自制免疫侧流层析试纸条的灵敏度。

结果

1.通过柠檬酸三钠还原法合成的Au作为核，进一步通抗坏血酸还原并沉积钯形成

壳，制备包含Au和Pd元素的合金纳米球（Au@PdNPs）。其中，AuNPs的粒径

为15nm，颜色为酒红色，在652nm处有明显的吸收峰。Au@Pd的粒径是20nm左

右，颜色由酒红色变为棕色，由于Pd壳的存在，652nm处的吸收峰消失。

I

2.粒径稳定性和溶血率实验证明Au@PdNPs具有良好的稳定性和生物安全性。

3.TMB显色实验证明Au@PdNPs具有过氧化物酶活性。当pH为4时，Au@PdNPs

纳米酶具有最佳过氧化物酶活性。

4.分别以TMB和HO作为底物，检测Au@PdNPs的K和V值。当以HO作

22mmax22

为反应底物时，Au@PdNPs的K-6-1