动物细胞培养和核移植技术上课.pptxVIP

植物细胞工程常用的技术手段有哪些？这些技术的理论基础是什么？植物组织培养和植物体细胞杂交植物细胞的全能性动物细胞全能性如何？

动物细胞工程2．2．1动物细胞培养和核移植技术第一课时

通常采用的技术手段是其他动物细胞工程技术的基础。04动物细胞核移植05动物细胞培养01单克隆抗体03动物细胞融合02动物细胞工程

注意关键词:细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养1阅读课文44—46页相关内容2

01动物细胞培养的概念是什么？该技术实施的原理是什么？02从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。原理是细胞增殖（有丝分裂）。聚焦一、动物细胞培养过程

聚焦一、动物细胞培养过程原代培养（细胞增殖）分装分离组织（低幼动物）传代培养（细胞增殖）分散细胞（胰蛋白酶）简述动物细胞培养的操作过程

细胞贴壁：01悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。02要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。03细胞的接触抑制：04当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。05动物细胞生长特点：

细胞贴壁过程那么什么是接触抑制？

动物细胞生长特性接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。

无菌操作培养箱

1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？2、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖，也不利于细胞营养物质的吸收和代谢废物的排出。先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。思考题3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质不能，因为两者的最适pH不同，

231幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？思考一下，这是什么道理？一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养思考题

这样的过程叫做传代培养思考题动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。

不都能不全是思考题上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养8、如何理解原代培养和传代培养？01有些为何能一直传下去？动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？发生突变，朝着癌细胞方向发展9、传代培养的细胞能一直传代下去吗？02

人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？01保存10代以内的细胞，因为10－50部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展02动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？03不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体04思考题

过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养胰蛋白酶剪碎细胞株细胞系遗传物质未改变遗传物质已改变

细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。1解答概念2

讨论多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题：充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境1.体外培养细胞时需要提供哪些物质无菌、无毒的环境。2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？

无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。）温度和PH5+0.5度；PH为。123654动物细胞培养条件补充合成培养基中缺乏的物质气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）

细胞的全能性细胞株、细胞系植物体或组织培养结果获得细胞或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养