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- 2025-07-04 发布于陕西
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高效液相色谱法
测定饮料中苯甲酸含量;一、实验目的
1.学习高效液相色谱仪的工作原理和操作要点。
2.了解高效液相色谱仪工作条件的选择方法。
3.学会使用高效液相色谱仪,识别色谱图。
4.掌握高效液相色谱仪测定苯甲酸的含量(标准曲线定量方法)的原理及方法。;二、实验原理
试样加温除去二氧化碳,,过滤后注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离后,根据保留时间和峰面积进行定性和定量。;三、仪器与试剂
2.试剂
(1)甲醇(色谱纯);苯甲酸(A.R);雪碧(500mL瓶装)。
(2)1000μg/mL苯甲酸标准贮备溶液;四、实验步骤
1.按操作说明书使色谱仪正常工作(可参考课本P158),色谱条件为:
柱温:室温
流动相:甲醇/水=60/40(经0.45μm滤膜过滤)
流动相流量:1.0mL/min
检测波长:223nm;四、实验步骤
2.苯甲酸标准系列溶液配制:分别用吸量管吸取2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL苯甲酸标准溶液(50.00μg/mL)于五只25mL容量瓶,用流动相定容至刻度,浓度分别为4.00、8.00、12.00、16.00、20.00μg/mL。;四、实验步骤
3.样品处理如下
将约100mL雪碧置于250mL洁净干燥的烧杯中,剧烈搅拌30min
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