食品分析技术Foodanalysistechnology8.pptxVIP

食品分析技术Foodanalysistechnology课程负责人：陈静课程建设单位：滁州职业技术学院

目录页PAGEOFCONTENT01高效液相色谱法（HPLC）02气相色谱-质谱联用法（GC-MS）猪肉中克伦特罗残留量检测常用方法04酶联免疫吸附法（ELISA）03生物传感器技术

（BS）

猪肉中克伦特罗残留量检测常用方法克伦特罗，即盐酸克伦特罗（CL），能够促进动物肌肉生长，尤其是促进骨骼肌蛋白质的合成，抑制动物脂肪生成，加速脂肪的转化和分解，提高牲畜的瘦肉率，俗称“瘦肉精”。

猪肉中克伦特罗残留量检测常用方法盐酸克伦特罗既不是兽药，也不是添加剂，是肾上腺素类神经兴奋剂，性质稳定，要加热至172℃才会分解，所以普通烹调方法根本无法破坏它的结构，是严重危害畜牧业发展和畜产品安全的有毒物质。

猪肉中克伦特罗残留量检测常用方法盐酸克伦特罗使用后在猪体组织中形成残留，尤其是在猪的肝脏等内脏器官残留较高，食用后直接危害人体健康。主要危害有：出现肌肉震颤、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐等症状，特别是对高血压、心脏病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，严重的可导致死亡。

猪肉中克伦特罗残留量检测常用方法猪肉中盐酸克伦特罗的检测方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、生物传感器技术

Part01高效液相色谱法（HPLC）

高效液相色谱法（HPLC）采用HPLC对盐酸克伦特罗分析时不需要进行衍生。其原理是C18或C8固定相能够与肾上腺素能激动剂分子相互作用，采用反相柱和质谱检测器、紫外检测器、电化学检测器等对瘦肉精进行检测。

高效液相色谱法（HPLC）HPLC具有高灵敏性、操作简便、分析自动化、节省时间、重现性好、假阳性率低、检测精度高等优点。其缺点是对设备要求高、价格昂贵、检测过程繁琐、样品处理时间长。

Part02气相色谱-质谱联用法（GC-MS）

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）气质联用通常用来检测血液和组织中残留的盐酸克伦特罗。由于GC适用于有较低沸点和较高热稳定性的样品，而盐酸克伦特罗极性大沸点高，因此测定前要对其进行衍生化。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）其原理是在pH值为5.2的缓冲液中，样品用芳基硫酸酯酶或者盐酸葡萄糖醛苷酶进行消化，用MCX小柱净化萃取液，分离的残留样品通过双三甲基硅烷基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后，采用GC-MS测定。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）GC-MS的优点是重复性好、准确性、检测灵敏度高，但所需要的仪器设备非常昂贵。同时样品前处理的技术要求很高、检测过程繁琐、难于操作，要求检测人员专业性强且具有丰富的实际操作经验。

Part03生物传感器技术（BS）

生物传感器技术（BS）生物传感器技术（BS）是将生物技术与微电子技术有机结合，采用生物体内抗原、抗体专一性结合从而改变电化学的特性设计成免疫生物传感器。

生物传感器技术（BS）将盐酸克伦特罗单克隆抗体微型化膜固定在换能器的表面，加入已知浓度的酶标激素于待测样品中，CL与标记抗原竞争性地附着在电极上的抗体，电极经过洗涤后与底物溶液接触，标记酶与底物发生化学反应，转变出来的电信号经过输出、处理分析直接显示残留CL的含量。

生物传感器技术（BS）生物传感器是采用生物活性物质作为敏感元件，与其他同类物质交叉反应低，特异性强，缺点是灵敏度低，反应时间长。

Part04酶联免疫吸附法（ELISA）

酶联免疫吸附法（ELISA）反应在已包被有盐酸克伦特罗抗体的塑料微孔中进行，将盐酸克伦特罗标准品或样品、酶标物加入微孔，温浴时，游离的和酶标记的盐酸克伦特罗竞争结合盐酸克伦特罗抗体的结合位点。

酶联免疫吸附法（ELISA）所有未反应的酶标物在洗涤步骤中被清除，结合了的酶可以由显色剂显示出来，因为酶可以使无色的显色剂转变成蓝色，反应终止液的加入则可以使蓝色变成黄色，吸收值可以在450nm处进行测定。颜色变化的程度反映样品中盐酸克伦特罗的含量，在一定浓度范围内吸光度的高低与样品中盐酸克伦特罗的含量成反比。

酶联免疫吸附法（ELISA）该法操作简便，准确，仪器设备简单，投资少，检测迅速，灵敏度高，适合于做大批量样品的快速分析。缺点是假阳性率高、不能实现现场检测，且要求样品处理、反应条件要尽可能一致。