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基因探针

——分子杂交技术

基因探针logo基因探针，即核酸探针，是一段带有检测标记，且序列已知的，与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。

分子杂交技术的分类根据其检测对象不同，可分为

基本操作程序印迹将样品在凝胶上分离，然后将样品通过“影印”的方式转移到固相支持物上（如滤膜）。杂交将已印迹有样品的滤膜与带有放射性标记或其它标记的探针进行杂交。结果检测通过放射自显影或显色反应，判断样品中是否有与探针同源的分子。

Southern杂交01检测样品DNA的处理02电泳分离及变性处理03转移并固定到滤膜上04探针的制备及杂交05检测与分析

检测样品DNA的处理提取检测样品的基因组DNA用限制性内切酶对其进行酶切，至大小不同的DNA片段

电泳分离及变性处理琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段变性处理通常DNA变性的方法：热变性、酸碱变性、化学试剂变性在0.4MNaOH碱性条件下变性凝胶0.4MNaOH

通过毛细管虹吸法，将凝胶上的DNA转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上。最后通过紫外线照射将DNA固定在滤膜上。转移并固定到滤膜上

转移的方法毛细管虹吸法、电转移法、真空转移法

探针的合成01PCR、化学合成等方法02探针的标记03同位素：3H、35S、32P等04非同位素：地高辛、生物素、荧光素等05探针的制备

地高辛：可以与dCTP连接成地高辛-dCTP地高辛+抗地高辛抗体