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必修2遗传与进化
第1章遗传的分子基础
第1节DNA是主要的遗传物质
1.实验研究发现遗传物质DNA或RNA
1.肺炎链球菌的类型
项目
有无多糖类荚膜
菌落特征
有无毒性
S型细菌
有
表面光滑
eq\a\vs4\al(有)
R型细菌
eq\a\vs4\al(无)
表面粗糙
无
2.格里菲思的体内转化实验
(1)实验①②对比说明R型细菌无毒,S型细菌有毒。
(2)实验②③对比说明加热致死的S型细菌无毒。
(3)实验②③④对比说明加热致死的S型细菌能使部分R型细菌转化为S型细菌。
(4)结论:格里菲斯认为,有某种化学物质从加热灭活的S菌进入了活的R菌中,从而使R菌具有了S菌“使小鼠致死”的性状。他将这种物质称为“转化因子”。
补充:1.体内转化实验中“加热”是否已导致DNA和蛋白质变性?加热杀死的S型细菌,其蛋白质变性失活,DNA在加热过程中,双螺旋解开,氢键断裂,但缓慢冷却时,其结构可恢复。
2.R型细菌转化为S型细菌的实质是什么?转化的实质是S型细菌的DNA片段整合到R型细菌的DNA中,即基因重组。
2.艾弗里的体外转化实验
1944年,美国科学家艾弗里等为了进一步探究格里菲斯提出的“转化因子”
的化学本质,进行了肺炎链球菌体外转化实验。他们将S菌裂解,提取出较为纯净的蛋白质、RNA、DNA等物质,分别与R菌混合,观察哪种物质能使R菌转化成S菌。
实验结果表明:
①几种物质中,只有DNA能够导致转化现象发生,且DNA的纯度越高,转化的效率越高;
②用DNA酶对DNA提取物进行处理,则不能使R菌发生转化。R菌转化为S菌之后,经细胞分裂产生的子代仍为S菌。
(2)结论:格里菲斯所说的“转化因子”不是蛋白质,而是DNA。
3.赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为材料,利用放射性同位素标记技术,证明DNA是遗传物质。
(1)实验材料:T2噬菌体(化学成分:蛋白质和DNA)
(2)生活方式:寄生在大肠杆菌体内。
(3)噬菌体的侵染过程:
增殖需要的条件
内容
模板
噬菌体的DNA
合成T2噬菌体DNA原料
大肠杆菌提供的4种脱氧核苷酸
合成T2噬菌体蛋白质
原料
大肠杆菌的氨基酸
场所
大肠杆菌的核糖体
(4)标记噬菌体的方法演示:
赫尔希等用放射性同位素35S和32P分别标记噬菌体的蛋白质和DNA后,分别侵染不含放射性同位素的大肠杆菌。然后进行搅拌,再通过离心使混合物分离成上清液和沉淀物两部分。
上清液中主要是较轻的噬菌体外壳。沉淀物主要是较重的、被侵染的大肠杆菌细胞。分别测定这两部分的放射性。
(5)检测结果表明:当使用35S标记时,大肠杆菌中几乎无放射性;当使用32P标记时,放射性则主要集中在大肠杆菌细胞内。这说明噬菌体在侵染时,其DNA进入细菌,而蛋白质留在细菌外。
(6)结论:T2噬菌体的遗传物质是DNA。
补充:①本实验采用的是放射性同位素标记技术,为什么用32P和35S进行标记?P是噬菌体DNA特有的元素,S是噬菌体蛋白质特有的元素,用32P和35S分别标记噬菌体的DNA和蛋白质,可以单独地观察它们各自的作用。
②能否同时用32P和35S标记噬菌体去侵染大肠杆菌?不能,因为放射性检测时,只能检测到放射性的存在部位,不能区分是何种元素发生的放射性。
③用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌时,沉淀物有较高放射性的原因是什么?可能由于搅拌不充分,有含35S的噬菌体外壳仍吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。
④用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中有较高放射性的原因有哪些?培养时间过短,部分噬菌体还未侵染大肠杆菌;培养时间过长或搅拌过于剧烈,部分子代噬菌体已经释放。
⑤噬菌体侵染细菌的实验中应注意的问题
(1)病毒营寄生生活,T2噬菌体只能侵染大肠杆菌,而不能侵染其他细菌。
(2)标记噬菌体时应先标记细菌,用噬菌体侵染被标记的细菌,这样来标记噬菌体。因为噬菌体是没有细胞结构的病毒,必须依赖活细胞生存。
(3)三次涉及大肠杆菌
第一次
培养
分别用含32P、35S的培养基培养大肠杆菌
目的
分别获得被32P、35S标记的大肠杆菌
第二次
培养
用无标记的T2噬菌体侵染上述被标记的大肠杆菌
目的
分别用含32P、35S标记的T2噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌
第三次
培养
分别用含32P、35S标记的T2噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌
目的
依据放射性主要分布在上清液还是沉淀物中,确认蛋白质和DNA是否“进入”大肠杆菌
4.烟草花叶病毒侵染烟草的实验
(1)烟草花叶病毒的组成:只含有蛋白质和RNA。
(2)侵染实验:
1955年,美国科学家弗伦克尔–康拉特和威廉姆斯从A、B两种类型TMV中分离出蛋白质和RNA,并重新组合成两种有活性的重组TMV。用重组TMV去感染烟草,并从病斑处收集子代TMV,鉴定其类型。
(3)实验
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