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摘要
桦褐孔菌发酵产物(Inonotusobliquusfermentationproducts,IOFP)应用于禽
类养殖不仅能够提高家禽的生长性能,还能够提升机体的免疫力,调节免疫反应
的类型,是效果良好的饲料添加剂和免疫增强剂。但应用于哺乳动物养殖是否也
能够起到相同效果,尚不得知。为了明确IOFP对哺乳动物生长和免疫性能的提
升作用及对toll样受体(Toll-likereceptors,TLRs)表达量的影响,本文选择伊拉
兔为模式动物,通过饲喂试验明确IOFP的功效。同时为了初步明确IOFP中的有
效功能物质,采用时间差异发酵方式制备发酵产物,结合不同组别伊拉兔生长性
能和免疫性能的表现差异,筛选获得有效成分。主要研究内容如下:
(1)桦褐孔菌发酵产物的制备及对伊拉兔生长性能和免疫性能的影响
采用深层发酵技术,以生物量为筛选指标,发现发酵时长为72h、120h和
168h的IOFP菌丝形态好,生物量高,用于后续试验。随机选择160只35日龄
伊拉兔按性别和体重随机分为4组,Ⅰ组为对照组饲喂基础日粮,试验组为Ⅱ组、
Ⅲ组、Ⅳ组,分别在基础日粮中添加0.8%(课题组前期试验结果)的发酵时长为
72h、120h和168h的IOFP,且均免疫兔瘟疫苗。试验结果表明:与对照组相比,
免疫后第35天,Ⅳ组平均日增重提升了0.29倍(P0.05),免疫后第21天和
35天时,Ⅳ组的料肉比分别为对照组的0.81、0.70倍(P0.05),能够促进胸
腺器官的发育(P0.05),显著提升兔瘟病毒特异性血凝抑制
(Hemagglutinationinhibition,HI)抗体效价和外周血淋巴细胞(Peripheralblood
lymphocytes,PBMC)增殖率;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组回肠的隐窝深度、肠壁厚度显著降低
(P0.05),显著提升了绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度(P0.05),显著提升
了CD4+和CD8+T淋巴细胞含量(P0.05),显著提升了IL-4的含量(P0.05)
和试验后期IFN-γ的含量(P0.05),回肠中occludin、ZO2基因的表达量均上
调,且Ⅳ组差异极显著(P0.01);并在不同程度上分别提高了血清中NO、T-
AOC、SOD的活性(P0.05)。综合分析发现,发酵时长为168h的IOFP对伊
拉兔生长性能和免疫性能的提升效果最好。
(2)桦褐孔菌发酵产物对伊拉兔TLRs表达量的影响
随机选择80只35日龄伊拉兔按性别和体重随机分为2组,Ⅰ组为对照组饲喂
基础日粮,Ⅱ组为试验组,饲喂添加0.8%的发酵时长为168hIOFP的基础日粮,
且均免疫兔瘟疫苗。利用荧光定量PCR法检测伊拉兔胸腺、脾脏、空肠等组织、
器官中TLRs的mRNA表达量,并进行了相关性分析。结果显示,饲喂IOFP提
升了伊拉兔的TLRs相对表达含量,各组织、器官中TLR9相对表达量最高;
TLRs在脾脏和胸腺中表达量最高。结果对于IOFP提升伊拉兔免疫性能的理解提
供了基础数据,同时为有效物质的筛选提供了依据。
(3)桦褐孔菌发酵产物主要功能物质的初步筛选
对不同发酵时长的IOFP进行质谱鉴定,结合不同发酵时长的IOFP对伊拉兔
生长和免疫性能的作用差异,对三组不同IOFP的代谢物,显著差异物质进行了
筛选和分析。经质谱测定、聚类分析、KEGG分析等,发现差异最显著的前三条
通路是cAMP信号通路、α-亚麻酸代谢通路和甘油磷脂代谢通路。
综上,IOFP也是肉兔适用的绿色饲料添加剂和免疫增强剂,能够为肉兔的健
康养殖提供有力的理论支撑。
关键词:桦褐孔菌发酵产物;伊拉兔;生长性能;免疫性能
Abstract
TheapplicationofInonotusobliquusfermentationproducts
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