发酵过程控制技术生物技术及应用08课件.pptxVIP

;;优良菌种选育

;目前，菌种选育中采用的技术包括：

自然选育

诱变选育

杂交育种

原生质体融合技术

基因工程技术;;采样

↓

增殖培养

↓

第一次平板分离→第一次原种斜面

↓

第二次平板分离→第二次原种斜面

↓

第三次平板分离→第三次原种斜面

↓

第四次平板分离→第四次原种斜面

↓

初步工艺条件摸索→复筛?种子培养

↓

较优菌株1－3株

保藏及进一步做生产性能试验某些必要试验和

或作为育种的出发菌株毒性试验等

;（一）采样

1、采样对象

以采集土壤为主。一般园田土和耕作过的沼泽土中，以细菌和放线菌为主，富含碳水化合物的土壤和沼泽地中，酵母和霉菌较多，如一些野果生长区和果园内。采样的对象也可以是植物，腐败物品，某些水域等。

;2、采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。

3、采土方式：在选好适当地点后，用小铲子除去

表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的

牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时

间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样

中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步

分批寄回，以便及时分离。;;?尽管通过增殖培养效果显著，但还是处于微生物的混杂生长状态。因此还必须分离，纯化。在这—步，增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用，而且控制得细一点，好一点。纯种分离的方法有划线分离法、稀释分离法。;;二、诱变育种

按照生产的要求，根据生物的遗转和变异的理论，用人工的方法造成菌种变异，再经过筛选、而达到菌种选育的目的。;;诱变育种方案设计;诱变剂（mutagen）：;(1)碱基类似物----间接引起置换的诱变剂;(2)与碱基起化学反应的诱变剂-----直接引起碱基置换;亚硝酸：对碱基的主要作用是氧化脱胺作用（使氨基变为酮基，

改变配对性质，引起碱基转换）。;烷化剂;(3)移码突变的诱变剂－嵌入诱变剂;2.物理诱变剂及其诱变机制;X‐射线、γ‐射线、快中子等属于电离辐射。以X‐射线为例解释该类诱变剂诱变机理：

X‐射线的诱变作用有直接和间接两种方式：

(1)直接作用是引起DNA双链间氢键的断裂、DNA单链的断裂、不同DNA分子之间的交联等。

(2)间接作用是电离辐射能从水或有机分子中产生自由基，这些自由基作用于DNA分子，引起缺失和损伤。自由基对嘧啶的作用更强烈。

此外，X射线还可能使细胞中形成一些碱基类似物，突变由这些碱基类似物所诱发。与紫外线不同的是，电离辐射可通过玻璃和其他物质，穿透力强，能达到生殖细胞，因此常用于动植物的诱变育种。;短时间的热处理也可诱发突变，热的作用是使胞嘧啶脱氨基而成为尿嘧啶，从而通过碱基配对错误而引起GC→AT的转换；

另外，热也可引起鸟嘌呤‐脱氧核糖键的移动，从而在DNA复制时出现包括两个鸟嘌呤的碱基对，在下一次的DNA复制中该碱基对错配就会引起GC→CG的颠换。;(1).转座因子（transposableelement)定义：位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列。广泛分布于原核和真核细胞中。又称“跳跃基因”;(4)转座的过程：;