普通光学显微镜的原理与使用.pptVIP

点光源经过光学仪器的小圆孔后，由于衍射的影响，所成的像不是一个点，而是一个明暗相间的衍射图样，中央为爱里斑。s1s2D**爱里斑第30页，共57页，星期日，2025年，2月5日瑞利判据：当一个点光源的衍射图样的中央最亮处刚好与另一个点光源的衍射图样的第一级暗纹相重合时，这两个点光源恰好能被分辨。恰能分辨能分辨不能分辨第31页，共57页，星期日，2025年，2月5日提高显微镜分辨率的方法：（1）增大物镜的数值孔径在物镜和盖玻片之间充以n较大的油，如香柏油n=1.52,不仅使n增大，而且孔径角?也增大。（2）用短波长的光照射如紫外光显微镜，电子显微镜。第32页，共57页，星期日，2025年，2月5日4显微镜的结构组成光学放大系统照明系统机械和支架系统物镜光源折光镜聚光镜滤光片目镜第33页，共57页，星期日，2025年，2月5日光学显微镜基本结构：1.照明灯(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物镜(Objectives)6.粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目镜(Oculars)8.照相机等接口(Connectiontocamera,etc.)第34页，共57页，星期日，2025年，2月5日第35页，共57页，星期日，2025年，2月5日4.1物镜物镜(objective)是光学显微镜成像系统中决定其分辨率或叫分辨本领的最关键部件。(1)消色差物镜(achromat)色差校正使可见光中红光和蓝光聚焦于一点，而黄绿光则聚焦于另一点。能够消除光谱中红光和蓝光所形成的色差。这种物镜与目镜配用时可达到消色差物镜所要求的光学性能。(2)复消色差物镜(apochromat)是性能最高的物镜。能消除可视光中黄、红、蓝即包括几乎所有谱线在成像过程中所造成的色差。第36页，共57页，星期日，2025年，2月5日(3)平象物镜它们所成的影象基本上是平的，象场弯曲很小，不会发生视野中心与边缘不能同时准焦的现象，因此对目视观察及显微摄影都极为方便。平象物镜由于将弯曲的影象展平，在同样放大倍数下它成的影象比用一般物镜要大一点。在平象物镜的金属外框上，刻有Flanachr、planapo、plan等字样。?(4)相差物镜相差物镜(Phasencontrastobjective)的一个透镜片上喷涂着一层环状金属膜板叫相位板。相位板是相差显微镜的关键部件。它和相差显微镜的聚光镜上的的环状光栏相配合使用。有关位相板涂料的性质和作用原理在以后详述。外壳上刻有Ph标记．第37页，共57页，星期日，2025年，2月5日第38页，共57页，星期日，2025年，2月5日物镜结构第39页，共57页，星期日，2025年，2月5日低倍物镜第40页，共57页，星期日，2025年，2月5日物镜标识第41页，共57页，星期日，2025年，2月5日无限远光学系统第42页，共57页，星期日，2025年，2月5日4.2目镜目镜的作用是把物镜放大的实象再放大一级，并把物象映入观察者的眼中，实质上目镜就是一个放大镜。显微镜的分辨率能力是由物镜的数值孔径所决定的，而目镜只是起放大作用。对于物镜不能分辨出的结构，目镜放的再大，也仍然不能分辨出。4.3聚光镜聚光镜装在载物台的下方。小型的显微镜往往无聚光镜，在使用数值孔径0.40以上的物镜时，则必须具有聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量的不足和适当改变从光源射来的光的性质，而且将光线聚焦于被检物体上，以得到最好的照明效果。第43页，共57页，星期日，2025年，2月5日第1页，共57页，星期日，2025年，2月5日主要内容显微镜的发展显微镜的光学原理显微镜的几个基本概念显微镜的结构显微镜的使用显微镜的维护第2页，共57页，星期日，2025年，2月5日要知道的几个重要的分辨率人眼：0.2mm/250mm光学显微镜：0.2um电子显微镜：0.2nm第3页，共57页，星期日，2025年，2月5日1.显微镜的发展1.1人眼：人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下，在25cm的明视距离内，人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的两个物体。也就是说，当两个物体相距不到0.1mm的时候，人眼就会把它们看