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生物分离与提纯项目六离子交换层析技术

目录Contents02任务一认识离子交换层析1任务二离子交换树脂2任务三离子交换操作方法3

03任务一认识离子交换层析

04一、离子交换现象定义：离子交换层析技术是应用离子交换剂作为吸附剂，通过静电引力将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上，用合适的洗脱剂将吸附物从离子交换剂上洗脱下来，因此达到分离、浓缩、纯化目的。图6-1离子交换层析基本原理示意图

05一、离子交换现象离子交换法由于所用介质无毒性且可反复再生使用，用或不用有机溶剂，因而具有设备简单、操作方便、劳动条件较好的优点。现已广泛应用于生物分离过程，在原料液脱色、除臭、目标产物的提取、浓缩和粗分离等方面发挥着重要作用。用离子交换法分离提纯各种生物活性代谢物质具有成本低、工艺操作方便、提取效率高、设备结构简单以及节约大量有机溶剂等优点。

06二、分离过程?离子交换从原理上来说，是指这里有两层离子，紧邻高分子表面的一层离子称为内层离子，在其外面是一层符号相反的离子层。

07二、分离过程（一）离子交换层析的基本原理离子交换层析分离生物分子主要是根据某些溶质能解离为阳离子或阴离子的特性，利用离子交换剂与不同离子结合力强弱的差异，将溶质暂时交换到离子树脂上，然后用合适的洗脱剂或再生剂将溶质离子交换下来，使溶质从原溶液中得到分离、浓缩或提纯的操作技术，整个离子交换过程可分为以下5个步骤。

08整个离子交换过程可分为以下5个步骤：可交换离子在溶液中经扩散过程穿过交换剂表面的水膜层到达交换剂表面。01可交换离子进入凝胶颗粒网孔，并到达发生交换的活性中心结构，发生了粒子扩散。02可交换离子取代交换剂上的反离子而发生离子交换。03被置换下来的反离子扩散到达凝胶颗粒表面，即粒子扩散。04反离子通过扩散穿过水膜到达溶液中，即膜扩散。05

09（二）离子交换选择性离子和离子交换树脂的活性基团的亲和力越大，就越容易被该树脂所吸附。影响离子交换树脂选择性的因素很多，主要有：离子化合价、离子的水化半径、溶液浓度、离子强度、溶液的pH、有机溶剂的影响、树脂物理结构的影响、树脂与离子间的辅助力等，具体离子交换选择性影响因素见表6-1：

10表6-1离子交换选择性影响因素类别影响因素离子化合价离子交换树脂总是优先吸附高价离子，而低价离子被吸附时则较弱离子的水化半径无机离子，离子水化半径越小，离子对树脂活性基团的亲和力就越大，也就越容易被吸附溶液浓度树脂对离子交换吸附的选择性，在稀溶液中比较大。在较稀的溶液中，树脂选择吸附高价离子离子强度高的离子浓度必定与目的物离子进行竞争，减少有效交换容量。另外，离子的存在会增加蛋白质分子以及树脂活性基团的水合作用，降低吸附选择性和交换速率。所以在保证目的物溶解度和溶液缓冲能力的前提下，尽可能采用低离子强度溶液的pH溶液的酸碱度直接决定树脂活性基团及交换离子的解离程度，不但影响树脂的交换容量，而且对交换的选择性影响也很大有机溶剂的影响当有机溶剂存在时，常会使离子交换树脂对有机离子的选择性降低，而容易吸附无机离子。树脂物理结构的影响树脂的交联度增加，其交换选择性增加。但对于大分子的吸附，情况要复杂些树脂与离子间的辅助力凡能与树脂间形成辅助力如氢键、范德华力等的离子，树脂对其吸附力就大。辅助力常存在于被交换离子是有机离子的情况下，有机离子的相对质量越大，形成的辅助力就越多，树脂对其吸附力就越大

11（三）离子交换过程和速度不论溶液的运动情况怎样，在树脂表面上始终存在着一层薄膜，A+和B+只能借扩散作用通过薄膜到达树脂的内部进行交换，实际的离子交换过程由五个步骤组成：①A+自溶液中通过液膜扩散到树脂表面→②A+穿过树脂表面向树脂孔内部扩散，到达有效交换位置→③A+与树脂内部的活性离子B+进行离子交换→④B+从树脂内部的活性中心向树脂表面扩散→⑤B+穿过树脂表面的液膜进入溶液中。假设一粒树脂在溶液中，发生下列交换反应A++RB≒RA+B+

12（三）离子交换过程和速度图6-2离子交换过程上述五个步骤中，步骤①和⑤、②和④互为可逆过程，扩散速度相同，而扩散方向相反，将步骤①和⑤称为外扩散；步骤②和④称为内扩散，步骤③称为交换反应。交换反应速度很快，而扩散速度很慢，离子交换过程的速度主要取决于扩散速度

13（四）离子交换速度的影响因素影响离子交换速度的因素很多，综合起来主要有以下七个方面，表6-2：类别影响因素树脂粒度离子的外扩散速度与树脂颗粒大小成反比，而离子的内扩散速度与