细胞融合技术的建立和发展第一节第四章细胞融合技术59课件.pptx

细胞融合技术的建立和发展第一节第四章细胞融合技术

细胞融合技术的涵义第一节细胞融合技术的建立和发展细胞融合技术(cellfusiontechnology)是指两种不同亲株经酶法除去细胞壁得到两个球状原生质体(protoplast)或原生质体球(spheroplast)，然后置于高渗溶液中，在以聚己二醇(polyethyleneglycol，PEG)助融和CaCl2,存在的条件下，促使两者互相凝集并发生细胞之间的融合，进而导致基因重组，获得新的菌株，这种融合又称为原生质体融合，其融合频率明显高于常规杂交育种数倍到几十倍。

细胞融合技术的涵义第一节细胞融合技术的建立和发展原生质体是细胞壁以内各种结构的总称,也是组成细胞的一个形态结构单位，活细胞中各种代谢活动均在此进行。原生质体包括细胞膜、细胞质、细胞核和细胞器等。原生质体中以蛋白质与核酸为主的复合物,是与生命活动相关最主要的成分。

细胞融合技术的涵义第一节细胞融合技术的建立和发展原生质体是一种非常好的瞬时表达系统。原生质体易于制备，单细胞群本身还可以摄取外源细胞器、病毒、质粒以及DNA等各种大分子物质。一般采用酶解法制备原生质体。现在的研究表明，用适当的酶处理，几乎能从任何种植物或任何类型的植物组织中有效地游离出原生质体。

细胞融合技术的涵义第一节细胞融合技术的建立和发展原生质体化后进行融合可克服天然性融合的屏障,并可进行遗传标记，可促进基因重组，对遗传育种选育优良品系，以达到高产优质具有重要实践意义。

细胞融合技术的建立和发展第一节细胞融合技术的建立和发展Muller于1838年观察到脊椎动的肿瘤细胞能在体内自发地融合产生多核的肿瘤细胞。Virchow于1858年描述了正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。Luginbuhl于1873年观察到天花病人的血液中也有多核的血细胞存在。Lange于1875年第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。Cienkawski(1876)、Buck(1877)、Geddes(1880)在无脊椎动中发现了细胞合并现象。1958年日本学者冈田（Okada）发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌预定单克隆抗体的杂交瘤细胞。20世纪80年代出现了电融合技术。

细胞融合技术的建立和发展第一节细胞融合技术的建立和发展生物种类细胞来源成功年代烟草两个种间苷蓝——青菜大豆——马唐草矮牵牛——龙面花大麦——花生大麦——大豆小麦——矮牵牛油菜——大豆玉米——大豆大豆——野豌豆大麦——蚕豆大豆——草香木犀酵母菌——鸡大豆——烟草大豆——秋水仙人——胡萝卜番茄——马铃薯人——小鼠叶——叶叶——根愈伤组织——叶叶——花瓣种子——种子叶——悬浮细胞叶——花瓣叶——悬浮细胞叶——悬浮细胞悬浮细胞——悬浮细胞叶——根悬浮细胞——叶原生质体——血红细胞悬浮细胞——叶悬浮细胞——叶腹水癌细胞——原生质体叶——根尖纤维肉瘤细胞——畸胎瘤细胞197219721972197319741974197419741974197419751975197519761976197619781978

细胞融合的意义第一节细胞融合技术的建立和发展理论上说任何细胞，都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦可发生重组，从而产生新的核外遗传系统。用于生产单克隆抗体、细胞疫苗等特定的生物制品。用于基因定位和绘制人类基因图谱。