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色谱分离的影响因素
分离度基本公式N:总的理论塔板数,柱效k’:容量因子(保留因子),色谱峰的保留作用α:色谱峰的相对分离程度,选择性作用
1、容量因子K’=组分在固定相中的质量/组分在流动相中的质量capacityfactor
1、容量因子k=0时,化合物全部存在于流动相中,在固定相中不保留;k越大,说明固定相对此组分的容量越大,出柱慢,保留时间越长。capacityfactor
1、容量因子
1、容量因子改变色谱法容量因子的最重要的方法是改变流动相的组成增加流动相的强度可降低流出物的容量因子对于反相色谱,有机相增加10%将使每个色谱峰的容量因子降低2到3倍
2、选择性因子又称分配系数比、分离因子。色谱用语,相邻两组分的分配系数或容量因子之比。selectivityfactor
2、选择性因子selectivityfactorα与化合物在固定相和流动相中的分配性质、柱温有关,与柱尺寸、流速、填充情况无关。
2、选择性因子
2、选择性因子
3、柱效columnefficiency色谱柱的有效塔板数越大或有效的塔板高度越低,色谱柱的柱效越好。
3、柱效提高液相色谱柱柱效的方法(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。(2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。(3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。(4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。(5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。(6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
4、其他因素柱外体积10μL20μL进样量样品体积连接管路的体积检测器体积检测器电子线路的时间常数
4、其他因素柱长所需分离度应与柱长匹配
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