《乳突类圆线虫感染诊断技术》.docxVIP

ICS11.220CCSB41

团体标准

T/CVMA267—2025

乳突类圆线虫感染诊断技术

DiagnostictechniquesforStrongyloidespapillosusinfection

2025-7-10发布2025-7-10实施

中国兽医协会发布

T/CVMA267—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国兽医协会团体标准技术委员会兽医寄生虫病防治分委会提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件起草单位：南京农业大学、岳阳职业技术学院、江苏农林职业技术学院。

本文件主要起草人：严若峰、李祥瑞、徐立新、宋小凯、陆明敏、许永得、李泽华、卜永谦。

T/CVMA267—2025

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乳突类圆线虫感染诊断技术

1范围

本文件规定了乳突类圆线虫感染的临床、病原学和分子生物学诊断技术。

本文件适用于牛羊等反刍动物乳突类圆线虫感染的诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

乳突类圆线虫病strongyloidosiscausedbyStrongyloidespapillosus

由乳突类圆线虫寄生于牛羊等反刍动物小肠黏膜内引起的以贫血、消瘦、腹泻为主要临床症状的一种寄生虫病。

3.2

乳突类圆线虫感染infectionofStrongyloidespapillosus

由乳突类圆线虫寄生于牛羊等反刍动物小肠黏膜内但不表现出临床症状的一种寄生虫感染。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp：碱基对（basepair）

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）

dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（deoxyribonucleosidetriphosphate）

EB：溴化乙锭（ethidiumbromide）

EDTA：乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid）

PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）

TAE：三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸（tris-acetate-EDTA）

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5试剂、耗材和设备

5.1试剂

卢氏碘液、生理盐水、饱和氯化钠溶液、50×TAE缓冲液、1×TAE缓冲液、10mg/mL溴化乙锭、1.0%琼脂糖凝胶、6×加样缓冲液等。本文件中所使用的试剂均为分析纯，水符合GB/T6682的要求。试剂制备或配置方法按照附录A进行。

5.2耗材

载玻片、盖玻片、平皿、PCR反应管、搪瓷盆、塑料盆、烧杯、试管、40目网筛、挑虫针、毛笔、吸管等。

5.3仪器

微量移液器、离心机、培养箱、光学显微镜、体视显微镜、PCR仪、紫外分光光度计、电泳仪等。

6临床诊断

6.1临床症状

6.1.1轻度感染

临床症状不明显，幼畜生长发育迟缓。

6.1.2感染初期

第三期幼虫穿过皮肤移行到肺，引起湿疹、咳嗽、呼吸困难。严重感染的动物可因极度衰弱而死亡。

6.1.3成虫寄生阶段

动物常表现出贫血、消瘦、腹泻等症状。

6.2流行特点

6.2.1易感动物

牛羊等反刍动物，幼龄动物较成年动物易感。

6.2.2感染途径

第三期幼虫主要经皮肤感染，幼畜哺乳时也可通过母畜乳汁感染。

6.2.3流行季节

夏季和雨季流行较普遍，圈舍清洁卫生不良且潮湿时易于流行。

6.3结果判定

动物出现6.1.3临床症状且符合6.2.1流行特点，判为疑似乳突类圆线虫病。疑似病例应使用病原学或分子生物学诊断方法进一步诊断。

7病原学诊断

T/CVMA267—2025

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7.1虫卵检查

7.1.1粪便样品准备

样品采集应符合NY/T541的要求。取待检动物新鲜粪便10g，置于烧杯，加入50mL饱和氯化钠溶液，混匀，用40目筛过滤至另一烧杯中。将滤液分装到2~3支试管中，液