目体外培养大鼠颅底软骨细胞并进行周期性张应变cyclic tensile分段书写摘要.pdfVIP

目的：体外培养大鼠颅底软骨细胞，并进行体外周期性张应变（Cyclictensile

strain，CTS）加载，研究CTS对颅底软骨细胞合成胞外基质的影响及CTS加载

后miRNA的表达差异。

方法：采用两步酶法分离培养1SD大鼠颅底软骨细胞，采用SABC

法检测Ⅱ型胶原及Sox9的表达来鉴定软骨细胞，定量分析传代过程中Sox9、

Col1a1、Col2a1、Col10a1mRNA的表达变化及COL2A1蛋白的表达变化。采用

FX-5000TM细胞加载系统对P2代软骨细胞施加1Hz、10%延伸率、sin波

形的CTS，加力时间为24h。对照组在同一时间静置培养于细胞加力板。定量分

析加力组与对照组内有关的表达差异及COL2A1蛋白的表达差异。使用

Illumina公司的HiSeqTM2000对加力组及对照组颅底软骨细胞进行miRNA深度

，包括c、簇生成、上机3个主要步骤，通过数据分析

获得差异表达的miRNA。

结果：体外培养的颅