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基于发根农杆菌介导的叶用莴苣遗传转化体系研究
目录
基于发根农杆菌介导的叶用莴苣遗传转化体系研究（1）．．．．．．．．．．4
内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1.1叶用莴苣产业现状与发展需求．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
1.1.2转基因技术在蔬菜改良中的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
1.2国内外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
1.2.1发根农杆菌遗传转化机制概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.2.2叶用莴苣遗传转化的现有技术路径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
1.2.3相关基因功能与改良研究述评．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
1.3本研究的目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
1.3.1核心研究目的设定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
1.3.2主要技术路线与实验内容安排．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.1.1叶用莴苣品种选取与培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
2.1.2发根农杆菌菌株来源与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
2.2.1植物材料无菌培养体系的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
2.2.2发根农杆菌菌株的保藏与活化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
2.2.3发根农杆菌介导的遗传转化过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
2.2.4转化植株的筛选与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
2.2.5转化体的再生与植株培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
2.2.6稳定性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
3.1发根农杆菌菌株对叶用莴苣的侵染效果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
3.2遗传转化条件的优化效果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
3.2.1不同渗透剂浓度对转化效率的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
3.2.2不同共培养时长对转化效率的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
3.3转化植株的初步筛选与鉴定结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
3.3.1PCR检测报告．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
3.3.2GUS报告基因表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
3.4转化莴苣再生植株的表型观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
3.5转基因莴苣的遗传稳定性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
基于发根农杆菌介导的叶用莴苣遗传转化体系研究（2）．．．．．．．．．46
一、文档概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
（一）研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
（二）国内外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
（三）研究内容与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
（一）实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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