2026版53高考总复习A版生物-精练册第24章基因工程.docxVIP

第24章基因工程

第1节重组DNA技术的基本工具和DNA的粗提取

五年高考

1.★★(2024山东,13,2分)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法正确的是()

A.整个提取过程中可以不使用离心机

B.研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后,应充分摇匀再倒入烧杯中

C.鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变

D.仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰

答案A

2.★★(2023广东,11,2分)“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是:裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是()

A.裂解:使细胞破裂释放出DNA等物质

B.分离:可去除混合物中的多糖、蛋白质等

C.沉淀:可反复多次以提高DNA的纯度

D.鉴定:加入二苯胺试剂后即呈现蓝色

答案D

3.★★★新思维·酶切失败的原因和解决方法分析(2024湖南,5,2分)某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时,发现DNA完全没有被酶切,分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是()

A.限制酶失活,更换新的限制酶

B.酶切条件不合适,调整反应条件如温度和酶的用量等

C.质粒DNA突变导致酶识别位点缺失,更换正常质粒DNA

D.酶切位点被甲基化修饰,换用对DNA甲基化不敏感的限制酶

答案B

4.★★★★(2023重庆,12,3分)某小组通过PCR[假设引物长度为8个碱基(短于实际长度)]获得了含有目的基因的DNA片段,并用限制酶进行酶切(如图),再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是()

A.其中一个引物序列为5-TGCGCAGT-3

B.步骤①所用的酶是SpeⅠ和CfoⅠ

C.用步骤①的酶对载体进行酶切,至少获得了2个片段

D.酶切片段和载体连接时,可使用E.coli连接酶或T4连接酶

答案B

5.★★★[2022福建,21(一)]美西螈具有很强的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体,具体方法如下。回答下列问题:

(一)基因工程抗原的制备

(1)根据美西螈CD14基因的核苷酸序列,合成引物,利用PCR扩增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3—OH与加入的脱氧核苷酸的5—P形成磷酸二酯键,则新合成链的延伸方向是(填“5→3”或“3→5”)。?

(2)载体和CD14片段的酶切位点及相应的酶切序列如图所示。用XhoⅠ和SalⅠ分别酶切CD14和载体后连接,CD14接入载体时会形成正向连接和反向连接的两种重组DNA。可进一步用这两种限制酶对CD14的连接方向进行鉴定,理由是。?

(3)培养能表达CD14蛋白的大肠杆菌,分离纯化目的蛋白。

答案(1)5→3(2)正向连接的重组DNA有这两种酶切位点(限制酶的识别序列);而反向连接的重组DNA会形成新的序列,没有这两种酶的酶切位点(没有限制酶的识别序列)

三年模拟

6.★★(2025届广东广州阶段考,3)研究人员将外源鲫鱼Mx基因(该基因产物能抵抗黏病毒)与质粒相连接构建基因表达载体,利用显微注射的方法将其导入草鱼体内,获得转基因抗病草鱼。下列叙述正确的是()

A.获得抗黏病毒草鱼方法的原理是基因重组

B.重组载体的受体细胞一般是已分化的体细胞

C.转录Mx基因需要解旋酶和DNA连接酶

D.构建重组载体的质粒一般是天然质粒

答案A

7.★★(2025届四川成都石室中学月考,13)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的相关描述,错误的是()

A.洋葱中加入适量研磨液,充分研磨、过滤并弃去滤液可以获得DNA

B.向溶有DNA的NaCl溶液中加入适量二苯胺,沸水浴后溶液呈蓝色

C.提取DNA时加入酒精,使溶于酒精的蛋白质等物质溶解

D.可以选择香蕉、猪肝、菠菜等作为实验材料提取DNA

答案A

8.★★★(2024届福建厦门三模,15)BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ三种限制酶的识别序列和切割位点依次为5-G↓GATCC-3、5↓GATC-3、5-CCC↓GGG-3。如图表示某DNA片段的部分碱基序列,已知其余序列不含这三种限制酶的识别序列。下列叙述正确的是()

A.若用SmaⅠ完全切割该DNA,则其产物的长度为634bp、896bp、758bp

B.若虚线方框内的碱基对被T—A替换,则用SmaⅠ完全切割该DNA可产生3种片段

C.若用MboⅠ和BamHⅠ切割DNA,可形成相同的黏性末端

D.用SmaⅠ切割DNA产生的片段,优选E.coliDNA连接酶重新将其连接

答案C

9.★★★★(2024届山东德州三模,15)研究人员用酶M和酶N两种限制酶同时处理某DNA分子