《南方水稻黑条矮缩病毒免疫斑点检测方法》.pdfVIP

ICS65.020

CCSB16DB32

江苏省地方标准

DB32/T××××—2025

南方水稻黑条矮缩病毒免疫斑点检测方法

Thedetectionofsouthernriceblack-streakeddwarfvirusbydotimmuobinding

assaymethod

（修订稿）

××××-××-××发布××××-××-××实施

江苏省市场监督管理局发布

DB32/T××××—××××

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由江苏省农业科学院提出。

本文件由江苏省作物标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：江苏省农业科学院，江苏省植物保护植物检疫站。

本标准起草人：周彤、杜琳琳、朱凤、周益军。

I

DB32/T××××—××××

南方水稻黑条矮缩病毒免疫斑点检测方法

1范围

本标准规定了水稻、玉米植株和白背飞虱携带南方水稻黑条矮缩病毒免疫斑点检测方法的原理、设

备仪器和试剂耗材、操作步骤。

本标准适用于水稻、玉米植株和白背飞虱携带南方水稻黑条矮缩病毒的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

SN/T2964植物病毒检测规范

3斑点酶联免疫吸附检测原理

硝酸纤维素膜（NC膜）具有很强的静电吸附力，在中性条件下可有效地吸附蛋白质等生物大分子，

并保持其免疫活性。将抗原吸附在硝酸纤维素膜表面，利用膜作为固相载体进行抗原抗体反应，通过与

相应的抗体和酶标抗抗体的一系列免疫反应，形成抗原-抗体-酶标抗抗体复合物，加入酶反应的底物后，

底物被催化出现颜色反应产生有色物质并沉着于抗原抗体复合物吸附的部位，呈现出肉眼可见的斑点，

可通过肉眼观察斑点的出现与否及颜色深浅程度判定受检样品中是否存在特定抗原及其浓度。

4设备仪器与试剂耗材

4.1设备仪器

台式离心机（5000r/min），具盖塑料离心管（200µL），培养皿（直径为90mm），塑料盒（规

格为100mm×50mm），微量天平，移液器，摇床。

4.2试剂耗材

4.2.1试验用水均为蒸馏水，使用的化学试剂未作说明的均为分析纯级别。

4.2.2碳酸盐包被液：0.05mol/L，pH9.6。称取1.59gNaCO和2.93gNaHCO，加水定容至1000mL，

233

用HCl调pH至9.6，4℃保存。

4.2.3磷酸盐Tween-20缓冲液（0.01MPBST）：0.01mol/L，pH7.5。称取40gNaCl，1gKCl，1gKHPO

24

和15gNaHPO，加水定容至5000m